活血化瘀方劑對急性高眼壓大鼠視網(wǎng)膜內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激的影響.pdf

1、目的：研究急性高眼壓大鼠視網(wǎng)膜的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激反應(endoplasmic reticulum stress，ERS)以及活血化瘀方劑對ERS的影響。
　　 方法：健康成年清潔型Wistar大鼠88只，隨機分為空白對照組（8只），高眼壓組（40只），治療組（40只）。除對照組外所有大鼠均隨機取一眼制作急性高眼壓模型，治療組在造模后給予活血化瘀方劑4ml/d灌胃，高眼壓組和治療組大鼠分別在造模后12h、1d，3d，7d，14d處死。H

2、E染色光鏡下觀察各組視網(wǎng)膜組織的形態(tài)學變化，免疫組織化學方法觀察視網(wǎng)膜GRP78、Thy-1-表達的變化，實時定量RT-PCR方法觀察視網(wǎng)膜GRP78mRNA、Thy-1mRNA的變化。
　　 結(jié)果：1.光鏡：高眼壓組造模后12h，視網(wǎng)膜全層水腫，胞核腫脹，視網(wǎng)膜變厚。造模后1d，視網(wǎng)膜水腫達高峰。造模后3d，視網(wǎng)膜水腫減輕，視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞(retinalganglial cells，RGCs)數(shù)目有所減少，視網(wǎng)膜開始變薄。造

3、模后7d，RGCs排列更加疏松。造模后14d，RGCs數(shù)目稀少，視網(wǎng)膜萎縮。治療組較高眼壓組在各時間點的變化趨勢相同，但程度都輕于高眼壓組。2.免疫組織化學：高眼壓組造模后12h，GRP78的表達量較正常對照組迅速上調(diào)(P＜0.05)，造模后1d，GRP78表達量達高峰(P＜0.05)，造模后3d表達量迅速降低，但仍高于對照組(P＜0.05)。治療組GRP78表達量在造模后12h較正常對照組顯著增多(P＜0.05)；造模后1d達高峰，但

4、增加量少于同時間點高眼壓壓組(P＜0.05)；造模后3d表達量降低，且低于同時間點高眼壓組(P＜0.05)。造模后7d，14d高眼壓組、治療組、對照組間均無統(tǒng)計學差異(P＞0.05)。造模后14d，高眼壓組和治療組Thy-1的表達量均降低，但治療組Thy-1表達量明顯高于高眼壓組。3.實時定量RT-PCR:高眼壓組造模后12h，GRP78mRNA水平較正常對照組迅速上調(diào)(P＜0.05)，造模后1d，GRP78mRNA水平達高峰(P＜0.

5、05)，造模后3d表達量迅速降低，但仍高于對照組(P＜0.05)。治療組GRP78mRNA表達量在造模后12h較正常對照組顯著增多(P＜0.05)；造模后1d達高峰，但增加量少于同時間點加壓組(P＜0.05)；造模后3d表達量降低，且低于同時間點高眼壓組(P＜0.05)。造模后7d，14d高眼壓組、治療組、對照組間均無統(tǒng)計學差異(P＞0.05)。造模后14d，高眼壓組和治療組Thy-1mRNA均降低，但治療組Thy-1mRNA水平明顯高