EGCG對(duì)去勢(shì)大鼠骨量丟失的預(yù)防效果和可能的機(jī)制研究.pdf

1、目的:
　　探討表沒(méi)食子兒茶素沒(méi)食子酸酯((-)-Epigallocatechin-3-gallate,EGCG)對(duì)雌性去勢(shì)(Ovariectomized,OVX)大鼠骨量丟失的早期預(yù)防效果、腹腔注射與灌胃途徑給藥效果和探討其預(yù)防骨量丟失的可能的作用機(jī)制。
　　方法:
　　將55只3月齡的正常健康雌性SD大鼠(Sprague-Dawley Rats)分別稱重,并按照各組間體重?zé)o統(tǒng)計(jì)學(xué)差異分為以下5組:A組,共15只:去

2、勢(shì)術(shù)后第3天開(kāi)始以10mg/kg/day的劑量經(jīng)腹腔(intraperitoneal,IP)注射給藥EGCG連續(xù)12周,記為(OVX+early EGCG/IP)、B組,共10只:去勢(shì)術(shù)后第7周開(kāi)始以10mg/kg/day的劑量經(jīng)腹腔注射EGCG連續(xù)給藥6周,記為(OVX+late EGCG/IP)、C組,共10只:去勢(shì)術(shù)后第3天開(kāi)始以10mg/kg/day的劑量經(jīng)灌胃(Oral Feeding,OF)給藥EGCG連續(xù)12周,記為(OV

3、X+early EGCG/OF)、D組,共10只:去勢(shì)大鼠無(wú)EGCG干預(yù)空白對(duì)照組,記為(OVX),和E組,共10只:假手術(shù)(Sham-operated)正常對(duì)照組,記為(SHAM)。12周后全部予以過(guò)量麻醉處死,留取雙側(cè)股骨和脛骨標(biāo)本分別進(jìn)行如下檢測(cè):1、Micro CT掃描,計(jì)算骨密度(BMD)和相關(guān)骨形態(tài)學(xué)參數(shù),2、進(jìn)行3點(diǎn)彎曲實(shí)驗(yàn)檢測(cè)、3、骨組織HE染色,并采用免疫組織化學(xué)染色檢測(cè)Sema4D蛋白的表達(dá)情況。
　　結(jié)果:<

4、br>　　骨形態(tài)學(xué)參數(shù):SHAM組(E組)中大鼠的骨密度(BMD)與松質(zhì)骨骨體積分?jǐn)?shù)(BV/TV)明顯高于其他4組大鼠的BMD以及BV/TV(P<0.01),同時(shí)A組大鼠的BMD和BV/TV明顯高于OVX組(D組)大鼠的BMD(P<0.05)。SHAM組(E組)中大鼠的松質(zhì)骨平均小梁分離度(Tb.Sp)明顯低于其余4組的Tb.Sp,且A組大鼠的Tb.Sp明顯低于OVX組(D組)大鼠的Tb.Sp(P<0.05)。SHAM組(E組)的平均骨

5、小梁厚度(Tb.Th)明顯高于其余各組(P<0.01),其余4組間無(wú)明顯差異。各組間松質(zhì)骨骨小梁數(shù)量(Tb.N)無(wú)明顯差異(P>0.05)。3點(diǎn)彎曲應(yīng)力試驗(yàn)結(jié)果:彎曲位移、最大彎曲應(yīng)力在各組之間,差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。骨組織學(xué)觀察:SHAM組(E組)的大鼠骨小梁分布更加致密,骨小梁數(shù)目更多,而OVX組(D組)的大鼠骨小梁稀疏。A組、B組以及C組的組織學(xué)形態(tài)介于OVX組和SHAM組之間。免疫組化結(jié)果:OVX組(D組)的Sem

6、a4D的陽(yáng)性表達(dá)面積百分比明顯高于其他各組的Sema4D表達(dá)水平(P<0.05),SHAM組(E組)與A組之間,Sema4D的陽(yáng)性表達(dá)面積百分比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
　　結(jié)論:
　　1.EGCG能夠延緩雌性去勢(shì)大鼠骨量丟失的進(jìn)程,且在10mg/kg/day的劑量下,較早期的干預(yù)可能優(yōu)于較晚期的干預(yù),但是EGCG的早期干預(yù)并不能完全阻斷去勢(shì)大鼠骨量丟失的進(jìn)程;
　　2.在10mg/kg/day的劑量下,EG