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1、目的: HSPB8為CMT2L的致病基因,我們意圖通過攜帶K141N突變的HSPB8轉(zhuǎn)基因小鼠模型上進(jìn)行超微病理學(xué)研究,觀察K141NHSPB8轉(zhuǎn)基因小鼠模型中HSPB8是否與HSPB1存在共定位。
方法: pCAGGS-K141NHSPB8轉(zhuǎn)基因小鼠傳代并經(jīng)PCR基因鑒定,取pCAGGS-K141NHSPB8轉(zhuǎn)基因小鼠與正常小鼠坐骨神經(jīng),應(yīng)用免疫組織化學(xué)雙重標(biāo)記染色后,在電鏡下觀察HSPB8、HSPB1的共定位情況。
2、r> 結(jié)果: (1)轉(zhuǎn)基因小鼠經(jīng)基因診斷確定HSPB8基因存在423G→T的錯(cuò)義突變。
(2) pCAGGS-HA-K141NHSPB8小鼠10nm標(biāo)記的HSPB8蛋白顆粒表達(dá)較多,20nm標(biāo)記的HSPB1蛋白表達(dá)增多,且HSPB8與HSPB1兩種蛋白之間存在著良好的共定位。
結(jié)論: (1)證實(shí)pCAGGS-K141NHSPB8轉(zhuǎn)基因小鼠模型的成功構(gòu)建,并順利傳代至F7代。
(2) HSP
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