巢蛋白過表達(dá)調(diào)控細(xì)胞增殖促進(jìn)小鼠胚胎心臟和腦的生長發(fā)育.pdf

1、南方醫(yī)科大學(xué)2 0 1 1 級碩士學(xué)位論文巢蛋白過表達(dá)調(diào)控細(xì)胞增殖促進(jìn)小鼠胚胎心臟和腦的生長發(fā)育N e s t i no v e r e x p r e s s i o np r o m o t e st h ee m b r y o n i c d e v e l o p m e n t o f h e a r ta n d b r a i nt h r o u g h r e g u l a t i o no fc e l lp r

2、 o l i f e r a t i o n課題來源：學(xué)位申請人 紀(jì)小珍{ 旨 導(dǎo) 教 師 安靚教授名 稱 腫瘤學(xué)類 型 學(xué)術(shù)型層 次 碩士研究生所 在 學(xué) 院 腫瘤研究所2 0 1 4 年5 月1 5 日 廣州業(yè)養(yǎng)養(yǎng) 專培培中文摘要通過下游的一系列酶促反應(yīng)促進(jìn)細(xì)胞進(jìn)入增殖周期。已有研究發(fā)現(xiàn)，P D G F ，T h r o m b i n 等細(xì)胞生長因子可增強(qiáng)n e s t i n 的表達(dá)從而調(diào)控細(xì)胞的增殖和／或存亡。例如，P D G

3、 F ( 曾報(bào)道可促進(jìn)腎小管上皮細(xì)胞的增殖) 可上調(diào)n e s t i n 的表達(dá)；體外實(shí)驗(yàn)表明T h r o m b i n 可上調(diào)n e s t i n 的表達(dá)從而促進(jìn)星型膠質(zhì)細(xì)胞的增殖。這些發(fā)現(xiàn)說明了細(xì)胞生長因子信號通路可調(diào)控n e s t i n 的表達(dá)，從而促進(jìn)細(xì)胞的增殖和存活。以上研究表明，n e s t i n 的體內(nèi)功能復(fù)雜，n e s t i n 是促進(jìn)細(xì)胞的增殖或者是抑制其凋亡仍然存在爭議。N e s t i n 作

4、為神經(jīng)干細(xì)胞的標(biāo)志物，其表達(dá)模式特別，一般情況下只表達(dá)于未分化成熟的細(xì)胞，細(xì)胞分化成熟后其表達(dá)下降甚至不表達(dá)。為此，我們提出假設(shè)，n e s t i n 過表達(dá)后能否維持細(xì)胞的增殖狀態(tài)? 發(fā)育過程中過表達(dá)n e s t i n能否影響細(xì)胞的正常凋亡?作為研究基因功能的一種重要作用手段，基因過表達(dá)技術(shù)備受大家青睞。到目前為止，n e s t i n 過表達(dá)轉(zhuǎn)基因小鼠體能功能的研究迄今尚無相關(guān)的報(bào)道。為了進(jìn)一步研究n e s t i n 的

5、體內(nèi)功能，我們課題組前期已經(jīng)成功構(gòu)建了n e s t i n過表達(dá)轉(zhuǎn)基因小鼠。前期的工作中發(fā)現(xiàn)，n e s t i n 過表達(dá)后可促進(jìn)肝臟損傷后肝細(xì)胞的再生增殖能力。本課題旨在利用該轉(zhuǎn)基因小鼠研究n e s t i n 過表達(dá)后對小鼠胚胎發(fā)育的影響，以便進(jìn)一步探討n e s t i n 的體內(nèi)功能。研究內(nèi)容與方法1 ．n e s t i n 在轉(zhuǎn)基因動(dòng)物胚胎主要器官中的表達(dá)水平采用P C R 、Q ．P C R 、W e s t e r

6、 n b l o t t i n g 方法從D N A 、m R N A 以及蛋白水平檢測n e s t i n 轉(zhuǎn)基因小鼠胚胎主要器官( 腦、心臟、肝臟、肺、皮膚) 中外源基因n e S t i n 的表達(dá)情況。2 ．n e s t i n 對轉(zhuǎn)基因小鼠胚胎生長的影響收集E 1 1 ．5 至E 1 8 ．5 發(fā)育階段的n e s t i n 轉(zhuǎn)基因小鼠和野生型小鼠胚胎標(biāo)本，肉眼觀察比較轉(zhuǎn)基因小鼠和野生型小鼠胚胎生長發(fā)育的差異。H E