微衛(wèi)星標(biāo)記技術(shù)和成像色度分析在馬氏珠母貝雜交育種中的應(yīng)用.pdf

1、我國是世界上最大的海水珍珠生產(chǎn)國，經(jīng)過四十余年的發(fā)展，近年來海水珍珠產(chǎn)量穩(wěn)定在20-25噸之間。馬氏珠母貝(Pinctada martensii Dunker)是我國珍珠生產(chǎn)主要用貝。珍珠養(yǎng)殖技術(shù)的發(fā)展無疑促進(jìn)了珍珠產(chǎn)業(yè)的發(fā)展，但在長期的生產(chǎn)中，由于對人工育苗親本數(shù)量和親本親緣關(guān)系的忽視，致使近親繁殖普遍，最終導(dǎo)致珍珠質(zhì)量下降，單產(chǎn)降低。目前，國內(nèi)外珍珠市場上規(guī)格大質(zhì)量好的珍珠供不應(yīng)求，而次殘珍珠過剩，充斥市場，使我國海水珍珠產(chǎn)業(yè)處于尷

2、尬境地。因此，馬氏珠母貝的遺傳改良及新品種的培育工作顯得日趨迫切。我院王愛民教授多年從事馬氏珠母貝的遺傳育種工作，近年來利用傳統(tǒng)雜交技術(shù)，通過馬氏珠母貝不同地域種群的雜交，獲得雜種優(yōu)勢，培育出了“海優(yōu)1號”，已開始在廣東、廣西和海南推廣應(yīng)用，對我國海水珍珠養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展做出了積極貢獻(xiàn)。為配合馬氏珠母貝的育種工作，本學(xué)位論文將微衛(wèi)星標(biāo)記技術(shù)和成像色度分析系統(tǒng)運(yùn)用到馬氏珠母貝雜交育種中得到以下結(jié)果： (1)通過8個(gè)微衛(wèi)星位點(diǎn)在馬氏珠母

3、貝雜交與對照組的4個(gè)群體內(nèi)研究表明，微衛(wèi)星標(biāo)記的等位基因數(shù)都在2個(gè)或2個(gè)以上，其中最高的為8個(gè)等位基因數(shù)：8個(gè)微衛(wèi)星標(biāo)記在4個(gè)群體中獲得總共146等位基因，期望雜合度值和觀察雜合度值也遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于同工酶；因此，微衛(wèi)星標(biāo)記在馬氏珠母貝群體中遺傳多樣性豐富，加上共顯性遺傳等特點(diǎn)，可以作為我們下一步開展微衛(wèi)星標(biāo)記作圖和QTL 定位的分子標(biāo)記。 (2)用微衛(wèi)星標(biāo)記分析馬氏珠母貝雜交和對照組發(fā)現(xiàn)，8個(gè)引物中僅有1個(gè)引物在4組群體中處于 Har

4、dy-Weinberg 平衡狀態(tài)，其他7個(gè)引物在不同的群體中都有處于極顯著的非平衡狀態(tài)。試驗(yàn)中所出現(xiàn) Hardy-Weinberg 平衡的非平衡狀態(tài)與無效等位基因的大量存在。 (3)用Fst檢查表明，馬氏珠母貝雜交與對照組的4群體之間有中等程度的遺傳分化；雜交子代與親本組之間的遺傳距離是不相等的，正交 H-3 與親本H-4 (母本)的遺傳距離最近，偏向母本組；反交H-2與親本H-4(父本)遺傳距離，相對較近，偏向父本組。無論是正

5、交(H-3)還是反交(H-2)都以三亞養(yǎng)殖貝(H-4)遺傳距離比較近，三亞野生貝在雜交后代的貢獻(xiàn)率大于印度養(yǎng)殖貝。 (4)成像色度分析系統(tǒng)能使珍珠貝顏色分辨定量化和數(shù)字化，分析表明馬氏珠母貝雜交組和對照組貝殼外緣珍珠質(zhì)顏色差別顯著，雜交親本顏色和色差差別較大；雜交增加了正反交后代間的顏色差異和色差值；兩雜交后代間色差值最大。雜交后代的貝殼外緣珍珠質(zhì)顏色更接近父本的珍珠質(zhì)顏色。初步判斷父本組的顏色往往決定子代的貝殼外緣珍珠質(zhì)的顏色

6、。由印度養(yǎng)殖貝作為父本所產(chǎn)生的雜交子代H-3的顏色接近父本的珍珠質(zhì)顏色，由于H-3在生長速度上有明顯的雜種優(yōu)勢，從而證明H-3因生長速度快可以作為育珠母貝使用，因顏色優(yōu)良又可作為細(xì)胞小片貝，因此，H-3是作為育珠母貝和細(xì)胞小片貝于一體的優(yōu)良品系。 (5)珍珠的顏色與細(xì)胞小片貝貝殼的顏色都有一定的相關(guān)性。H-1 和 H-3所產(chǎn)生的珍珠顏色質(zhì)量較好；而H3是三亞野生貝♀×印度養(yǎng)殖貝♂雜交(正交)所產(chǎn)生的后代，在生長速度和插核育珠效果