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文檔簡介
1、內(nèi)生真菌一般指那些在其生活史的某一階段或者整個生活史生長于植物體內(nèi),不引起宿主明顯病癥的真菌,其與植物的長期協(xié)同進化中,形成了一種復(fù)雜、特殊的關(guān)系,可以互惠共生,也可能是潛在病原菌,或者是潛在兼性腐生菌。鏈格孢屬真菌廣泛存在于自然界,能引起多種農(nóng)作物病害。鏈格孢也是大量植物的優(yōu)勢內(nèi)生真菌,但目前對于內(nèi)生鏈格孢屬真菌生活史及生態(tài)功能了解較少。通過對玉米優(yōu)勢內(nèi)生真菌鏈格孢的研究,對闡明內(nèi)生鏈格孢屬真菌與宿主的相互關(guān)系,了解內(nèi)生鏈格孢生活史和
2、生態(tài)功能,以及指導(dǎo)玉米耕作栽培具有重要意義。
本實驗對實驗室分離保存的玉米內(nèi)生鏈格孢真菌進行分析,表明內(nèi)生鏈格孢在玉米體內(nèi)的分布具有廣泛性及多樣性,對10個代表性形態(tài)型的菌株基于rDNA-ITS序列進行系統(tǒng)發(fā)育分析,均與小孢子種類聚在一起,通過ITS序列無法進行種級區(qū)分。通過形態(tài)學(xué)鑒定,10株鏈格孢均為小孢子種鏈格孢,初步鑒定:Y1為A. alternata,Y4為A. catalpae,Y5與Y6歸入A. tenuissim
3、aspecies-group, Y8為A. peponicola,Y9為A. ellisii,Y10為A. platycodonis,Y11歸入A. alternata species-group,Y12為A. triticimaculans,Y13為A. coicis。
通過溶磷能力檢測、對玉米生長發(fā)育的影響、降解能力初步探討了玉米內(nèi)生鏈格孢真菌生態(tài)功能,并且以一株產(chǎn)酶能力最強的菌株為研究對象,進行了某些生物學(xué)特性研究。
4、r> 在溶磷試驗中,10株鏈格孢菌均不能在PVK平板上形成透明圈,初步判斷其不具備溶磷作用。10株菌對玉米發(fā)芽率,苗期的株高、莖粗及根長均無顯著性影響。通過對玉米接種內(nèi)生鏈格孢菌株,發(fā)現(xiàn)10株內(nèi)生鏈格孢菌株對苗期玉米無致病性。而在與4種玉米病原菌的平板對峙試驗中,10株鏈格孢菌對4種玉米病原菌均顯示出抑制作用,其中菌株 Y6對玉米禾谷鐮刀菌的抑菌率最高,達到了69.01%;菌株Y13對玉米大斑菌的抑制效果最好,達68.05%;菌株Y1
5、2對玉米圓斑抑制率達53.18%;菌株Y8對玉米彎孢菌的抑制率為67.03%。
通過對10株鏈格孢菌株產(chǎn)纖維素酶、漆酶活性和對玉米秸稈的降解能力研究,發(fā)現(xiàn)鏈格孢屬內(nèi)生真菌具有一定的腐生能力。通過革蘭氏碘液平板、愈創(chuàng)木酚及苯胺藍平板篩選,10株鏈格孢均能產(chǎn)纖維素酶及漆酶,不具有錳過氧化物酶及木質(zhì)素過氧化物酶活性。通過纖維素酶活及漆酶酶活測定,菌株 Y13的纖維素酶及漆酶活力均最高,以菌株 Y13為代表,進行玉米秸稈降解實驗,實驗
6、組秸稈失重率在10天、20天、30天分別為22%、34.7%、41.2%,高于對照組的10%、11.7%及12.5%,表明菌株 Y13對秸稈有較好的降解力。研究菌株Y13在不同碳、氮源下的生長情況,結(jié)果表明,菌株 Y13的最佳碳、氮源分別是麥芽糖、乳糖及蛋白胨。菌株Y13在不同碳、氮源下產(chǎn)漆酶能力有顯著差異,在碳源為麥芽糖及乳糖時產(chǎn)漆酶活力最高,氮源為蛋白胨時漆酶活力最高,與菌株生長的最適碳、氮源一致。
通過上述研究,發(fā)現(xiàn)玉米
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