細(xì)胞周期調(diào)控基因P21及胰島素樣生長因子-1在大鼠視網(wǎng)膜發(fā)育期的表達.pdf

1、目的：觀察大鼠視網(wǎng)膜發(fā)生發(fā)育過程中細(xì)胞周期調(diào)控基因P21及胰島素樣生長因子-.(IGF-1)表達的時空變化特點，結(jié)合視網(wǎng)膜發(fā)育的組織學(xué)變化規(guī)律，探討P21及IGF-1對組織學(xué)變化的影響，推測其在視網(wǎng)膜發(fā)生發(fā)育過程中所起的作用。 方法：清潔型SD大鼠，分為胚胎期各組，生后期各組及成年期組。胚胎期又分為孕14天(E1.d)、孕16天(E16d)、孕18天(E18d)、孕20天(E2.d)組，出生后大鼠按日齡分為3天(.3)、8天(P

2、8)、15天(P15)、21天(P21)、成年鼠(12月齡Ad)組，每組各5只。用HE染色方法觀察視網(wǎng)膜發(fā)育的組織學(xué)變化，用免疫組織化學(xué)方法、半定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(revers.transcription-polymeras.chai.reaction，RT-PCR)方法分別檢測視網(wǎng)膜P21及IGF-1蛋白及mRNA的表達。 結(jié)果：HE染色結(jié)果顯示E14d視網(wǎng)膜分二層結(jié)構(gòu)，外層為色素上皮層，內(nèi)層為神經(jīng)母細(xì)胞層；E18d神經(jīng)母

3、細(xì)胞層分內(nèi)外兩層；E20d內(nèi)叢狀層明顯，神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層多層排列；P8d，內(nèi)外叢狀層均出現(xiàn)，神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層單層排列；P15d，視網(wǎng)膜十層結(jié)構(gòu)分化完全；P21的陽性表達主要定位于胞核內(nèi)，胚胎期主要表達于神經(jīng)母細(xì)胞層，色素上皮層也見表達。在E14d可見弱陽性表達，隨胎齡增加，陽性表達逐漸增高，于E18d出現(xiàn)最強的陽性表達，以后逐漸減低，直到成年期仍可見P21的弱表達，成年期主要定位于神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層、內(nèi)外叢狀層。IGF-1在胚胎發(fā)育期的表達規(guī)律是隨胎

4、齡增加表達逐漸增強，陽性表達主要定位于胞核內(nèi)，神經(jīng)母細(xì)胞層陽性細(xì)胞明顯。E18d可見最強的陽性表達，E20d可見較強的陽性表達，之后開始逐漸下降，一直持續(xù)到P8d，自P8d至P21d，IGF-1的表達又有增強趨勢，成年期在神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層、內(nèi)外叢狀層仍可見IGF-1的弱陽性表達。各期之間表達差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。 結(jié)論：P21及IGF-1的表達規(guī)律說明胚胎期存在活躍的細(xì)胞增殖與分化，視網(wǎng)膜的逐層發(fā)育正是在P21及IGF