早期糖尿病大鼠視網(wǎng)膜VEGF和COX-2的表達(dá)及意義.pdf

1、目的：探討環(huán)氧化酶2(COX-2)和血管內(nèi)皮生長因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)在早期糖尿病大鼠視網(wǎng)膜上的表達(dá)及意義。
　　 方法：選用清潔級、雄性Sprague-Dawley大鼠共30只，體重約為180-220克全部在屏障系統(tǒng)中飼養(yǎng)。隨機分為糖尿病模型組(DM組，n=15)，正常對照組(對照組，n=15)。將糖尿病組的大鼠禁食12h，一次性腹腔注射2％STZ溶液（臨用時用0

2、.1mol/L、pH4.5的檸檬酸緩沖液配置），劑量為65mg/kg體重。藥物注射后48h檢測血糖，血糖濃度高于16.7mmol/L，尿量、飲水明顯增多即為模型建立成功，低于上述標(biāo)準(zhǔn)則為造模失敗。正常組予以腹腔注射0.1mol/L、pH4.5的檸檬酸緩沖液。血糖濃度觀察每2周測定1次，尾靜脈取血用血糖儀監(jiān)測血糖。視網(wǎng)膜標(biāo)本采集糖尿病誘導(dǎo)成功后12周腹腔注射過量鹽酸氯胺酮處死，立即取出雙眼，取眼球放于10％酸性福爾馬林中固定，石蠟包埋、4

3、um連續(xù)切片。用免疫組化法檢測COX-2及VEGF在視網(wǎng)膜的表達(dá)。用胰酶消化視網(wǎng)膜行PAS視網(wǎng)膜血管染色，觀察視網(wǎng)膜血管形態(tài)變化。
　　 結(jié)果：(1)大鼠一般情況：糖尿病大鼠造模成功率100％，成模糖尿病大鼠逐漸出現(xiàn)精神萎靡、活動減少、多飲、多尿、多食、體重減輕、毛發(fā)枯黃無光澤、墊料極潮，每天需更換1-2次。(2)PAS染色：DM組及正常大鼠視網(wǎng)膜毛細(xì)血管網(wǎng)排列均規(guī)則，未見血管閉塞、毛細(xì)血管腔栓塞以及內(nèi)皮細(xì)胞增生形成毛細(xì)血管瘤。