核因子-κB P65、IL-8及MMP-9在SIAI孕婦不同組織中的表達(dá)及臨床意義的探索.pdf

1、早產(chǎn)是常見的妊娠并發(fā)癥，約占整個妊娠的5％-15％。早產(chǎn)兒發(fā)病率和病死率明顯高于正常足月產(chǎn)新生兒，約占圍產(chǎn)兒死亡率的2/3，因此一直受到產(chǎn)科界的關(guān)注。研究發(fā)現(xiàn)早產(chǎn)與宮內(nèi)感染關(guān)系密切，將與宮內(nèi)感染相關(guān)的早產(chǎn)稱為感染性早產(chǎn)。根據(jù)報道早產(chǎn)孕婦中有約58％-88％被證實有組織學(xué)絨毛膜羊膜炎改變。但臨床上多數(shù)孕婦呈現(xiàn)亞臨床表現(xiàn)，癥狀不典型，給臨床診斷帶來困難。以往感染性早產(chǎn)診斷主要依靠羊水細(xì)菌培養(yǎng)陽性或胎盤胎膜組織學(xué)檢查發(fā)現(xiàn)絨毛膜羊膜炎，但上述方

2、法前者所需時間較長，后者需要產(chǎn)后才能確診，不能達(dá)到早期診斷早期治療的目的。近年來有研究者通過檢測孕婦外周血中CRP(CRP)、補體及免疫球蛋白IgM、IgG、IgA、IgS等預(yù)測感染性早產(chǎn)，但臨床應(yīng)用中發(fā)現(xiàn)這些指標(biāo)均存在敏感性和特異性較低的問題。因此從早產(chǎn)發(fā)病機制著手，尋找早期反映羊膜腔內(nèi)感染敏感性和特異性高的指標(biāo)成為目前研究的熱點。 NF-κ B是近年來發(fā)現(xiàn)的一種核轉(zhuǎn)錄因子，啟動并調(diào)節(jié)機體炎癥和免疫反應(yīng)、凋亡及細(xì)胞的增值分化等

3、相關(guān)基因的轉(zhuǎn)錄。參與早產(chǎn)及分娩發(fā)動過程的許多炎性因子如IL-8等的分泌，均受NF-κB的調(diào)控。也有報道MMP-9的基因上游調(diào)節(jié)元件中含有NF-κB結(jié)合位點，與NF-κB結(jié)合后啟動基因的轉(zhuǎn)錄<'[2]>。 白介素-8(IL-8)是一種重要的炎性細(xì)胞因子，參與機體的炎性反應(yīng)，被認(rèn)為是介導(dǎo)羊膜腔內(nèi)感染的炎性介質(zhì)，能客觀反映羊膜腔內(nèi)感染的情況，IL-8的表達(dá)明顯增高提示宮內(nèi)感染的存在。根據(jù)大量研究推測IL-8可能通過刺激多核白細(xì)胞的侵潤

4、繼而促進(jìn)MMPs的分泌。 MMPs是一組鋅依賴的蛋白水解酶，主要參與細(xì)胞外基質(zhì)的代謝。MMP-9是MMPs家族中的一員，可特異性地降解Ⅳ型膠原。Ⅳ型膠原主要存在于絨毛膜和羊膜的基底層。研究發(fā)現(xiàn)MMP-9活性的升高與胎膜中膠原的降解密切相關(guān)，MMP-9參與正常足月分娩胎膜破裂的發(fā)生。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)伴有羊膜腔內(nèi)感染的胎膜早破患者，其體內(nèi)MMP-9的表達(dá)明顯高于正常妊娠。但MMP-9與感染的關(guān)系并未得到闡明。 NF-κB是IL

5、-8、MMP-9的基因表達(dá)促進(jìn)因子，IL-8參與促進(jìn)MMP-9的分泌，MMP-9表達(dá)異常增高導(dǎo)致胎膜破裂。NF-κB、IL-8、MMP-9在亞臨床絨毛膜羊膜炎的發(fā)生中是否存在相關(guān)性?它們在孕婦血清、胎盤胎膜中的表達(dá)如何，又與胎兒臍血中的表達(dá)存在什么關(guān)系，目前尚未見報道。因此，本實驗選擇了早產(chǎn)這一常見的妊娠并發(fā)癥作為研究對象，從胎盤胎膜入手，通過不同的實驗方法觀察NF-κB與IL-8及MMP-9的表達(dá)變化及組織形態(tài)學(xué)的改變；比較母外周血及

6、臍血中NF-κB、IL-8與MMP-9水平。從而探討NF-κB、IL-8與MMP-9的含量與亞臨床絨毛膜羊膜炎的關(guān)系及其在發(fā)病機制中的作用，為早期預(yù)測感染性早產(chǎn)及為臨床上早期制定治療方案提供理論依據(jù)。 第一章NF-κB P65蛋白預(yù)測亞臨床絨毛膜羊膜炎價值的研究 目的：研究NF-κB P65在亞臨床絨毛膜羊膜炎孕母血、臍血、胎盤胎膜組織中的表達(dá)變化，探討其在亞臨床絨毛膜羊膜炎發(fā)病機制中的作用，評價其預(yù)測亞臨床絨毛膜羊膜炎

7、及亞臨床絨毛膜羊膜炎治療效果的臨床價值。 方法：選擇早產(chǎn)臨產(chǎn)組36例，先兆早產(chǎn)組14例，足月妊娠自然臨產(chǎn)組37例，足月妊娠同期對照組38例，早產(chǎn)同期對照組18例。通過HE染色、免疫組織化學(xué)、免疫細(xì)胞化學(xué)、Western Blotting、RT-PCR五種實驗方法，觀察NF-κB P65在亞臨床絨毛膜羊膜炎孕母血、臍血、胎盤胎膜組織中的表達(dá)變化。 結(jié)論： 1．亞臨床絨毛膜羊膜炎孕母血白細(xì)胞中NF-κB P65表達(dá)增

8、高，可能作為預(yù)測亞臨床絨毛膜羊膜炎實驗室指標(biāo)之一，且有可能作為評價亞臨床絨毛膜羊膜炎治療效果實驗室指標(biāo)之一； 2．亞臨床絨毛膜羊膜炎胎兒臍血中NF-κB P65表達(dá)增高，可能作為預(yù)測早產(chǎn)亞臨床絨毛膜羊膜炎實驗室指標(biāo)之一，且有可能作為評價治療亞臨床絨毛膜羊膜炎預(yù)后實驗室指標(biāo)之一； 3．亞臨床絨毛膜羊膜炎孕婦胎盤胎膜組織中NF-κB P65蛋白表達(dá)增高，提示NF-κB P65在亞臨床絨毛膜羊膜炎發(fā)病機制中起到重要的作用。

9、 第二章IL-8預(yù)測亞臨床絨毛膜羊膜炎價值的研究 目的：研究IL-8在亞臨床絨毛膜羊膜炎孕婦母血、臍血、胎盤胎膜組織中的表達(dá)水平的變化，探討其在亞臨床絨毛膜羊膜炎發(fā)病機制中的作用，評價其早期預(yù)測感染性早產(chǎn)的價值。 方法：選擇早產(chǎn)臨產(chǎn)組36例，先兆早產(chǎn)組14例，足月妊娠自然臨產(chǎn)組37例，足月妊娠同期對照組38例，早產(chǎn)同期對照組18例。通過ELISA、HE染色、免疫組織化學(xué)3種實驗方法，觀察IL-8蛋白在早產(chǎn)亞臨床絨毛膜

10、羊膜炎孕婦母血、臍血、胎盤胎膜組織中的表達(dá)變化。 結(jié)論： 1．亞臨床絨毛膜羊膜炎孕婦母血清中IL-8表達(dá)增高，可能作為預(yù)測早產(chǎn)亞臨床絨毛膜羊膜炎實驗室指標(biāo)之一，且有可能作為評價早產(chǎn)亞臨床絨毛膜羊膜炎治療效果實驗室指標(biāo)之一； 2．亞臨床絨毛膜羊膜炎胎兒臍血中IL-8表達(dá)增高，可能作為預(yù)測亞臨床絨毛膜羊膜炎實驗室指標(biāo)之一，且有可能作為評價治療亞臨床絨毛膜羊膜炎預(yù)后實驗室指標(biāo)之一； 3．亞臨床絨毛膜羊膜炎孕婦胎

11、盤胎膜組織中IL-8表達(dá)增高，提示IL-8因子參與亞臨床絨毛膜羊膜炎發(fā)病。 4．亞臨床絨毛膜羊膜炎胎兒臍血中IL-8蛋白表達(dá)增高，可能作為預(yù)測新生兒感染性疾病的實驗室指標(biāo)之一，有助于早期協(xié)助診斷新生兒感染性疾病并及時指導(dǎo)臨床治療；并且可能作為新生兒感染性疾病療效及愈后評價的實驗室指標(biāo)。 第三章MMP-9預(yù)測亞臨床絨毛膜羊膜炎價值的研究 目的：研究MMP-9在亞臨床絨毛膜羊膜炎孕婦母血、臍血、胎盤胎膜組織中的表達(dá)水

12、平的變化，探討其在亞臨床絨毛膜羊膜炎發(fā)病機制中的作用，評價其早期預(yù)測感染性早產(chǎn)的價值。 方法：選擇早產(chǎn)臨產(chǎn)組36例，先兆早產(chǎn)組14例，足月妊娠自然臨產(chǎn)組37例，足月妊娠同期對照組38例，早產(chǎn)同期對照組18例。通過ELISA、HE染色、免疫組織化學(xué)3種實驗方法，觀察MMP-9蛋白在早產(chǎn)亞臨床絨毛膜羊膜炎孕婦母血、臍血、胎盤胎膜組織中的表達(dá)變化。 結(jié)論： 1．亞臨床絨毛膜羊膜炎孕婦母血清中MMP-9蛋白表達(dá)增高，可能