蜂膠左金丸對(duì)幽門螺桿菌體外抑菌實(shí)驗(yàn)的研究.pdf

1、目的：(1)簡(jiǎn)化幽門螺桿菌(Helicobacter pylori,H.pylori,Hp)培養(yǎng)操作,優(yōu)選Hp培養(yǎng)與保存條件。(2)評(píng)價(jià)蜂膠、黃連及吳茱萸對(duì)Hp的體外聯(lián)合抗菌效應(yīng). (3)應(yīng)用中藥血清藥理學(xué)方法進(jìn)行含蜂膠左金丸血清抗Hp的體外抑菌實(shí)驗(yàn)。 方法：(1)自創(chuàng)微需氧罐,正交設(shè)計(jì)優(yōu)選Hp培養(yǎng)條件,并對(duì)-20℃保存的不同濃度兩種保存液Hp復(fù)蘇對(duì)照觀察。(2)采用棋盤法設(shè)計(jì),瓊脂倍比稀釋法測(cè)定不同濃度組合的蜂膠、黃連及吳茱

2、萸對(duì)Hp最低抑菌濃度,并計(jì)算FIC指數(shù)判定聯(lián)合效應(yīng)。(3)不同劑量蜂膠左金丸經(jīng)灌胃給藥后,分離大鼠血清,采用打孔瓊脂擴(kuò)散法,對(duì)四種不同處理(新鮮未滅活、新鮮滅活、冰凍未滅活、冰凍滅活)后含藥大鼠血清進(jìn)行體外抑菌試驗(yàn),測(cè)定抑菌環(huán)。 結(jié)果：(1)自創(chuàng)微需氧罐成功培養(yǎng)出Hp；哥倫比亞瓊脂和腦心浸液瓊脂中分別添加5.3﹪濃度小牛/綿羊血清和2.6﹪濃度混合抗生素,PH值7.5時(shí),Hp生長(zhǎng)良好；-20℃條件下：30﹪甘油/布氏肉湯和20

3、﹪甘油/腦心浸液菌種保存時(shí)間分別為7天和20天.(2)黃連與吳茱萸聯(lián)合應(yīng)用對(duì)Hp呈相加作用；蜂膠與黃連、吳茱萸聯(lián)合應(yīng)用對(duì)Hp均呈協(xié)同作用。(3)不同劑量含蜂膠左金丸血清和含生理鹽水血清對(duì)Hp均有明顯抑制作用,且呈一定的量效關(guān)系；新鮮未滅活含藥血清抑制Hp作用較新鮮滅活血清強(qiáng)；冰凍未滅活血清抗菌作用降低,冰凍滅活血清失去抗菌能力。 結(jié)論：(1)自創(chuàng)微需氧罐操作簡(jiǎn)便、效果可靠；哥倫比亞瓊脂或腦心浸液瓊脂+小牛血清+混合抗生素最適合

4、Hp生長(zhǎng),混合抗生素能有效控制雜菌污染,對(duì)細(xì)菌生長(zhǎng)無(wú)影響；-20℃條件下減少甘油含量,增加培養(yǎng)基濃度,能延長(zhǎng)菌種保存時(shí)間。(2)三種藥物聯(lián)合應(yīng)用后,MIC顯著降低,體外抗Hp作用顯著增強(qiáng).抗菌效應(yīng)以協(xié)同及相加作用為主,無(wú)無(wú)關(guān)作用及拮抗作用。(3)中藥血清藥理學(xué)方法可反映中藥真實(shí)血藥濃度的體外抗菌效果；發(fā)現(xiàn)大鼠血清中含有對(duì)Hp抑制或殺滅作用的活性物質(zhì)；-20℃冰凍保存3周后未滅活含藥血清仍具有抗菌能力；在含藥血清體外抑菌實(shí)驗(yàn)中,以使用新鮮