DLC-1基因兩個轉(zhuǎn)錄本在膠質(zhì)瘤中的表達(dá)研究.pdf

1、膠質(zhì)瘤是中樞神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤中最常見的原發(fā)惡性腫瘤，約占顱內(nèi)腫瘤的44％。由于膠質(zhì)瘤呈浸潤性生長，因而手術(shù)過程中很難確切判定腫瘤邊界。這樣一方面使病人殘、死的幾率因手術(shù)區(qū)域無謂的擴(kuò)大而大大增加；另一方面，即使腫瘤組織在顯微鏡下全部切除，仍約殘余104～105個的具有較強(qiáng)的增殖能力的腫瘤細(xì)胞，成為膠質(zhì)瘤復(fù)發(fā)的基礎(chǔ)?，F(xiàn)有的抗腫瘤藥物因血腦屏障、對正常腦組織不可逆的毒副作用等亦收效甚微。統(tǒng)計表明惡性膠質(zhì)母細(xì)胞瘤綜合治療后的平均生存期不足12個月，

2、2年生存率僅為10％，因此，膠質(zhì)瘤的治療目前仍是世界公認(rèn)的難題。 造成膠質(zhì)瘤難于防治的根本原因在于其病因不明確。研究表明，基因的異常表達(dá)是膠質(zhì)瘤的發(fā)生發(fā)展的本質(zhì)原因，而且是一個涉及多種基因、多階段的復(fù)雜過程，包括癌基因的激活和抑癌基因失活。PTEN、TFPI-2、RASSF1A和BLM等基因的缺失或突變已被證實在膠質(zhì)瘤中起重要作用，表達(dá)p53、Rb等抑癌基因能有效誘導(dǎo)腦癌細(xì)胞凋亡或者抑制其增殖。因而，揭示膠質(zhì)瘤的分子遺傳機(jī)制對于

3、闡明膠質(zhì)瘤的發(fā)病原因具有重要的意義，目前也是膠質(zhì)瘤病因研究領(lǐng)域的熱點。 DLC-1基因位于8號染色體短臂上，編碼蛋白為RhoGAPs。DLC-1表達(dá)下調(diào)，會使Rho因子持續(xù)激活，進(jìn)而引起細(xì)胞惡性增殖，長成腫瘤。近期研究顯示DLC-1能有效抑制肝癌、乳腺癌、肺癌、前列腺癌、胃癌和血液惡性腫瘤等腫瘤生長。此外，DLC-1基因還具有抑制腫瘤細(xì)胞侵襲和轉(zhuǎn)移的作用。由此可見，DLC-1是一個新的重要的抑癌基因。 但是，DLC-1

4、基因在膠質(zhì)瘤組織中的表達(dá)如何，是否也是膠質(zhì)瘤的一種抑癌基因，目前尚未見報道。本課題著重研究DLC-1基因不同轉(zhuǎn)錄本在膠質(zhì)瘤中的表達(dá)，旨在為進(jìn)一步揭示DLC-1基因在膠質(zhì)瘤發(fā)病中的遺傳學(xué)機(jī)制提供理論依據(jù)。 研究目的:研究DLC-1基因兩個轉(zhuǎn)錄本在膠質(zhì)瘤組織中的表達(dá)。 研究方法:以廣州醫(yī)學(xué)院第二附屬醫(yī)院神經(jīng)外科2007年6月1日到2008年2月日收治的49例膠質(zhì)瘤患者作為研究對象，并選取10例顱腦損傷患者行內(nèi)減壓手術(shù)時的腦組

5、織標(biāo)本為對照組，根據(jù)DLC-1基因第二轉(zhuǎn)錄本及第一轉(zhuǎn)錄本mRNA序列設(shè)計上下游引物，抽提組織中的總RNA，實時熒光定量PCR檢測膠質(zhì)瘤組織和對照組腦組織中DLC-1基因第二轉(zhuǎn)錄的mRNA表達(dá)水平；RT-PCR擴(kuò)增，檢測第一轉(zhuǎn)錄本在膠質(zhì)瘤組織和對照組腦組織的表達(dá)情況。 研究結(jié)果: 1.實時熒光定量PCR結(jié)果表明，膠質(zhì)瘤中的DLC-1基因第二轉(zhuǎn)錄mRNA高表達(dá)，而在對照組腦組織中DLC-1基因第二轉(zhuǎn)錄mRNA低表達(dá)；其中，4

6、6份（93％）膠質(zhì)瘤組織中DLC-1基因第二轉(zhuǎn)錄本mRNA表達(dá)量高于對照組腦組織。 2.將膠質(zhì)瘤樣本進(jìn)行WHO病理分級，Ⅰ級膠質(zhì)瘤組織中DLC-1基因第二轉(zhuǎn)錄本mRNA水平顯著高于Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ級樣本中水平。 3.7例對照組腦組織中均有表達(dá)DLC-1基因第一轉(zhuǎn)錄本，而在15例膠質(zhì)瘤組織中有13例DLC-1基因第一轉(zhuǎn)錄本表達(dá)水平顯著降低，對照組腦組織中DLC-1基因第一轉(zhuǎn)錄本mRNA轉(zhuǎn)錄水平是膠質(zhì)瘤組織的2-3倍。 結(jié)