Caveolin-1和survivin在腎癌中的表達(dá)及其相關(guān)性研究.pdf

1、腎細(xì)胞癌(renal cell carcinoma,RCC)是常見的泌尿系統(tǒng)惡性腫瘤之一,簡稱腎癌,其發(fā)病率在泌尿系腫瘤中僅次于膀胱癌據(jù)第二。隨著人們生活方式和飲食習(xí)慣的不斷改變,。腎癌的發(fā)病率和死亡率有逐年上升的趨勢。腎癌起病隱匿,早期癥狀多不為患者所注意。一旦出現(xiàn)腰痛、血尿等癥狀或觸及腹部包塊時(shí)大多已屬于晚期,5年存活率不足50％,其預(yù)后具有不可預(yù)測性。腎癌的以手術(shù)治療為主,對放、化療不敏感,免疫治療的價(jià)值亦很有限。
　　隨著

2、現(xiàn)代分子和細(xì)胞生物學(xué)技術(shù)的發(fā)展,人們認(rèn)識到腎癌的發(fā)生和發(fā)展是多階段、多步驟的復(fù)雜過程,涉及到許多腫瘤相關(guān)因子。Caveolin-1(小窩蛋白1)是一種新發(fā)現(xiàn)的與腫瘤形成、生長和凋亡密切相關(guān)的重要因子,近年來對其生物學(xué)功能的研究成為熱點(diǎn)。Caveolin-1是細(xì)胞膜表面caveolae(胞膜窖)形成特異性穴樣內(nèi)陷的微區(qū)結(jié)構(gòu)所必需,是分子量為21~24kD的膜整合蛋白。已有大量的證據(jù)表明caveolin-1可能執(zhí)行腫瘤抑制基因的功能,但其具

3、體的作用機(jī)制仍未完全明了。
　　目前國內(nèi)外關(guān)于caveolin-1在腎癌中表達(dá)情況的文獻(xiàn)報(bào)道甚少,其與腎癌發(fā)生、發(fā)展、浸潤和轉(zhuǎn)移的關(guān)系尚需要進(jìn)一步明確。Survivin(存活素)是凋亡抑制蛋白(inhibitor of apoptosis protein)家族的新成員,其組織分布具有明顯的細(xì)胞選擇性。在正常成人已分化的成熟組織(胸腺、生殖腺除外)不表達(dá),而在人類多種腫瘤組織中均有表達(dá)。Survivin參與抑制細(xì)胞凋亡和調(diào)節(jié)細(xì)胞有絲

4、分裂的過程,其作用于各個(gè)凋亡途徑的交匯點(diǎn),抑制由caspase-3和caspase-7過度表達(dá)而誘發(fā)的凋亡。
　　研究報(bào)道survivin在肺癌、肝癌及結(jié)腸直腸癌中高表達(dá),被認(rèn)為與這些腫瘤的不良預(yù)后有關(guān)。還有學(xué)者認(rèn)為survivin可以作為新發(fā)生或復(fù)發(fā)性膀胱癌敏感的診斷方法之一。而當(dāng)前有關(guān)survivin與腎癌相關(guān)性的報(bào)道不多,其與腎癌發(fā)生和預(yù)后的關(guān)系亦需要進(jìn)一步闡明。腎細(xì)胞癌的發(fā)生與發(fā)展受到多種基因的調(diào)控。
　　本研究旨在

5、通過檢測caveolin-1及survivin蛋白在腎癌各種病理亞型、各臨床分期和不同組織學(xué)分級組的表達(dá)情況,分析他們與腎癌臨床生物學(xué)行為的關(guān)系和兩種蛋白表達(dá)之間的相關(guān)性。從而了解腎癌惡性轉(zhuǎn)化及浸潤和轉(zhuǎn)移的分子學(xué)機(jī)制,尋找與腎癌相關(guān)的有價(jià)值的生物學(xué)標(biāo)示,為腎癌的臨床診斷和治療提供新的理論和方法。
　　材料與方法：
　　1.收集標(biāo)本:收集鄭州大學(xué)2005年6月~2007年6月手術(shù)切除的95例腎細(xì)胞癌標(biāo)本和14例距離腫瘤邊緣>5

6、 cm的正常腎組織。95例腎癌中腎透明細(xì)胞癌74例,乳頭狀細(xì)胞癌9例,嫌色細(xì)胞癌11例,集合管癌1例。所有患者術(shù)前均未行放療、化療和介入栓塞治療。其中90例行根治性腎切除術(shù),5例行腎部分切除術(shù)。95例腎癌中臨床Ⅰ期52例,Ⅱ期24例,Ⅲ期11例,Ⅳ期8例,伴區(qū)域淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移4例,肝轉(zhuǎn)移1例,肺及肋骨轉(zhuǎn)移1例。組織學(xué)分級:高分化組48例,中分化組32例,低分化組15例。
　　2.實(shí)驗(yàn)方法:采用免疫組織化學(xué)PV-9000法檢測caveo

7、lin-1和survivin蛋白在95例腎細(xì)胞癌的手術(shù)切除標(biāo)本和14例正常腎組織中表達(dá)的情況。3.統(tǒng)計(jì)學(xué)分析:所有數(shù)據(jù)采用SPSS10.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。各組間率的比較采用χ~2檢驗(yàn)或Fisher’s精確概率法。各指標(biāo)表達(dá)的相關(guān)性采用Spearman相關(guān)分析。以a=0.05為檢驗(yàn)顯著性水準(zhǔn)。
　　結(jié)果：
　　1.Caveolin-1蛋白在正常腎和腎癌組織的陽性表達(dá)率分別為100％(14/14)和38.9％(37/95),

8、二者之間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。Caveolin-1蛋白在腎透明細(xì)胞癌、乳頭狀細(xì)胞癌、嫌色細(xì)胞癌中陽性表達(dá)率分別為39.2％(29/74)、33.3％(3/9)和36.4％(4/11),三組之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。1例集合管癌表達(dá)陽性(未比較)。
　　2.Caveolin-1蛋白在腎癌高、中、低分化組中的陽性表達(dá)率分別為12.5％(6/48)、65.6％(21/32)和66.7％(10/15),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)

9、意義(P<0.05)。其中,中分化組和低分化組陽性表達(dá)率顯著高于高分化組,而中分化組和低分化組之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　3.Caveolin-1蛋白在腎癌臨床分期Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組中的陽性表達(dá)率分別為25.0％(13/52)、33.3％(8/24)、81.8％(9/11)和87.5％(7/8),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。其中Ⅲ組和Ⅳ組陽性表達(dá)率均顯著高于Ⅰ組和Ⅱ組,而Ⅲ組和Ⅳ組以及Ⅰ組和Ⅱ組之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　

10、　4.Survivin蛋白在正常腎和腎癌的陽性表達(dá)率分別為0％(0/14)和68.4％(65/95),二者之間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。Survivin蛋白在腎透明細(xì)胞癌、乳頭狀細(xì)胞癌、嫌色細(xì)胞癌中陽性表達(dá)率分別為68.9％(51/74)、66.7％(6/9)和63.6％(7/11),三組之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。1例集合管癌表達(dá)陽性(未比較)。
　　5.Survivin蛋白在腎癌高、中、低分化組中陽性表達(dá)率分

11、別為45.5％(22/48)、90.6％(29/32)和93.3％(14/15),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。其中,中分化組和低分化組陽性表達(dá)率顯著高于高分化組,而中分化組和低分化組之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　6.Survivin蛋白在腎癌臨床分期Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期組中的陽性表達(dá)率分別為57.7％(30/52)、70.8％(17/24)、90.9％(10/11)和100％(8/8),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。其中Ⅲ組和

12、Ⅳ組陽性表達(dá)率均顯著高于Ⅰ組和Ⅱ組,而Ⅲ組和Ⅳ組以及Ⅰ組和Ⅱ組之間的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　7.局限性腎癌(臨床Ⅰ、Ⅱ期組)組織中caveolin-1和survivin蛋白表達(dá)之間呈負(fù)相關(guān)(r~s=—0.665,P<0.05)。在局部進(jìn)展性和轉(zhuǎn)移性腎癌(臨床Ⅲ、Ⅳ期)組織中caveolin-1和survivin蛋白均高表達(dá),二者呈正相關(guān)(r~s=0.563,P<0.05)。
　　結(jié)論：
　　1.Caveolin-1在腎

13、組織正常表達(dá),在腎癌組織表達(dá)且與腎癌分期和分級密切相關(guān),但存在雙向表達(dá)模式。即在低分級、低分期腎癌中caveolin-1低表達(dá),可能發(fā)揮著腫瘤抑制基因的作用;隨腎癌分級、分期的升高,caveolin-1表達(dá)重新升高,可能發(fā)揮腫瘤促進(jìn)基因的作用。這提示caveolin-1可作為腎癌檢測的生物學(xué)指標(biāo)。
　　2.Survivin在正常腎組織無表達(dá),在腎癌組織高表達(dá),其表達(dá)與腎癌分期和分級密切相關(guān),而與腎癌病理分型無關(guān)。提示其在腎癌的發(fā)生