白細胞介素7(IL-7)對不明原因復發(fā)性流產(chǎn)小鼠模型外周Th17-Treg細胞以及妊娠結局的影響.pdf

1、目的:
　　探討著床期應用白細胞介素7(IL-7)對不明原因復發(fā)性流產(chǎn)小鼠模型外周Th17/Treg細胞以及妊娠結局的影響。
　　方法:
　　1)將CBA/J雌鼠分別與DBA/2、Balb/c雄鼠2:1合籠,構建正常小鼠妊娠模型和自然流產(chǎn)小鼠模型;
　　2)小鼠合籠見陰道栓為妊娠第0天,將自然流產(chǎn)模型小鼠隨機分為兩組:流產(chǎn)小鼠對照組及流產(chǎn)小鼠研究組;
　　3)研究組在小鼠孕第4天腹腔注射IL-715ul/只

2、/天,隔天一次,連續(xù)3次,對照組不用藥,分別于孕第14天處死各組孕鼠;
　　4)計算各組胚胎吸收率,探討IL-7對小鼠流產(chǎn)模型妊娠結局的影響;
　　5)提取各組小鼠脾臟淋巴細胞;
　　6)流式細胞儀檢測分析孕鼠脾臟CD4+CD25+Foxp3+、CD4+IL-17A+細胞比例變化,來探討IL-7在小鼠流產(chǎn)模型對Treg/Th17細胞的作用;
　　7)熒光定量PCR檢測孕鼠子宮蛻膜Foxp3 mRNA和RORγt

3、mRNA的變化,探討IL-7是否可以調節(jié)Treg細胞特異性轉錄因子Foxp3和Th17細胞特異性轉錄因子RORγ在小鼠流產(chǎn)模型外周的表達。
　　結果:
　　1)成功建立正常小鼠模型和流產(chǎn)小鼠模型;
　　2)經(jīng)IL-7處理的流產(chǎn)模型孕鼠胚胎吸收率(33.78％)明顯高于正常小鼠對照組(8.6%)、自然流產(chǎn)模型孕鼠(25.58%),差異顯著(P<0.05);
　　3)流式分析結果顯示:經(jīng)IL-7處理的流產(chǎn)小鼠研究組脾

4、淋巴細胞CD4+CD25+Foxp3+/CD4+細胞比例(2.71±0.28%)顯著低于正常小鼠對照組(4.57±0.31%)、自然流產(chǎn)小鼠對照組(3.51±0.29%),差異顯著(P<0.05);IL-7處理的流產(chǎn)小鼠脾淋巴細胞CD4+IL-17A/CD4+細胞比例(6.45±0.28%)高于正常小鼠(1.84±0.16%)、低于流產(chǎn)小鼠(4.29±0.63%),差異顯著(P<0.05);
　　4)熒光定量PCR擴增Foxp3

5、mRNA和RORγt mRNA的變化,經(jīng)IL-7處理的流產(chǎn)小鼠Foxp3 mRNA的2-ΔΔCT值為0.43±0.18,Foxp3 mRNA的表達低于流產(chǎn)小鼠0.67±0.16(P<0.05);RORγt mRNA的2-ΔΔCT值為4.77±1.38,高于流產(chǎn)小鼠1.97±0.53(P<0.05)。
　　結論:
　　小鼠的自然流產(chǎn)模型建立成功。在相同實驗條件下,經(jīng)過IL-7處理的流產(chǎn)小鼠研究組與流產(chǎn)小鼠對照組比較,胚胎吸收率