胃腸道間質(zhì)瘤細胞組織在不同周齡裸小鼠不同部位生長情況比較研究.pdf

1、背景和目的
　　 胃腸道間質(zhì)瘤(gastrointestinal stromal tumor，G IST)作為20世紀(jì)80年代才提出的一個新概念，隨著分子生物學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展與進步，有研究表明，GIST目前已經(jīng)成為消化道最常見的間葉源性腫瘤，GIST作為一種非定向分化的消化道間質(zhì)腫瘤，目的就是區(qū)別于發(fā)生在胃腸道的其他肌源性或神經(jīng)源性肉瘤，過去由于缺乏特異性的免疫組織化學(xué)技術(shù)，電鏡下單從形態(tài)上難以區(qū)分腫瘤類別，該類腫瘤常被誤診為平

2、滑肌或神經(jīng)來源的腫瘤。目前，雖然沒有判斷GIST良惡性的統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)，但大多數(shù)人認(rèn)為腫瘤大小及核分裂像是胃腸道間質(zhì)瘤預(yù)后的重要指標(biāo)，同時，腫瘤是否破潰也對預(yù)后產(chǎn)生重要影響。目前，關(guān)于GIST的細胞學(xué)研究和動物學(xué)研究報道較少，本文在建立裸鼠皮下移植瘤模型的前提下，比較在不同周齡個體的裸小鼠不同部位皮下移植瘤生長情況，可為以后其他疾病建立裸鼠荷瘤模型提供參考，并在活體狀態(tài)下研究胃腸道間質(zhì)瘤細胞的發(fā)生、發(fā)展和各種生物學(xué)特點及篩選各種抗癌藥物提供一

3、個必不可少的工具；為進一步實驗研究搭建平臺。
　　 材料與方法
　　 將40只裸小鼠按周齡隨機分為兩組，每組再以接種部位不同隨機分成2組，共四組，取新鮮間質(zhì)瘤手術(shù)標(biāo)本，無菌條件下分成2cm×2cm×2cm大小組織塊，將分離好的間質(zhì)瘤組織塊分別接種于4周齡裸鼠腋下、4周齡裸鼠臀部、8周齡裸鼠腋下、8周齡裸鼠臀部部位，將裸鼠嚴(yán)格飼養(yǎng)在無特定病原體(SPF)環(huán)境下，恒溫(22-26℃)，恒濕(40-60％)，每三天記錄一次腫瘤

4、生長體積，直至腫瘤長至1 cm3，并繪制生長曲線圖，處死裸小鼠并觀察瘤體形態(tài)，內(nèi)臟有無轉(zhuǎn)移，并行病理組織學(xué)和免疫組織化學(xué)檢測與人胃腸間質(zhì)瘤標(biāo)本進行比較；各組計量數(shù)據(jù)采用x±s表示，運用四格表x2檢驗，方差分析對數(shù)據(jù)處理，p<0.05表示差異具有統(tǒng)計學(xué)意義，SAS軟件進行統(tǒng)計學(xué)分析。
　　 結(jié)果：
　　 1.成瘤率：腫瘤接種于4周齡裸鼠腋下部位(100％)較接種于4周齡裸鼠臀部(80％)皮下成瘤率高；接種于4周齡裸鼠腋下部

5、位(100％)較接種于8周齡裸鼠腋下部位(70％)成瘤率高；接種于4周齡裸鼠臀部部位(80％)較接種于8周齡裸鼠臀部部位(40％)成瘤率高；以上p<0.05，差異有統(tǒng)計學(xué)意義。但腫瘤接種于8周齡裸鼠腋下部位(70％)與接種于8周齡裸鼠臀部部位(40％)，p>0.05，尚不能說明兩者有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　 2.破潰率：腫瘤接種于4周齡裸鼠臀部部位(10％)較接種于4周齡裸鼠腋下部位(0％)破潰率高；接種于8周齡裸鼠臀部部位(20％)

6、較接種于8周齡裸鼠
　　 腋下部位(0％)破潰率高，以上p<0.05，差異有統(tǒng)計學(xué)意義；而腫瘤接種于8周齡裸鼠臀部部位(20％)與接種于4周齡裸鼠臀部部位(10％)比較，p>0.05，尚不能說明兩者有統(tǒng)計學(xué)意義，并且接種于4周齡裸鼠腋下和8周齡裸鼠腋下部位的腫瘤均沒有破潰現(xiàn)象(0％)。
　　 3.軟化消失率：腫瘤接種于4周齡裸鼠臀部(10％)較接種于4周齡裸鼠腋下部位(0％)軟化率高；接種于8周齡裸鼠腋下(30％)較接種

7、于4周齡裸鼠腋下部位(0％)軟化率高；接種于8周齡裸鼠臀部部位(40％)較接種于4周齡裸鼠臀部(10％)軟化率高，以上p<0.05，差異有統(tǒng)計學(xué)意義；而腫瘤接種于8周齡裸鼠臀部(40％)較接種于8周齡裸鼠腋下(30％)，兩者軟化率比較，p>0.05，尚不能說明兩者有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　 4.腫瘤生長速度：腫瘤接種于4周齡裸鼠腋下部位體積長至1cm3的時間(21.00±2.00天)較接種于8周齡裸鼠腋下(27.86±1.46天)所需

8、時間短；接種于4周齡裸鼠臀部(25.33±1.58天)較接種于8周齡裸鼠臀部(31.50±3.00天)所需時間短，以上p<0.05，差異有統(tǒng)計學(xué)意義；而腫瘤接種于4周齡裸鼠腋下部位與接種于4周齡裸鼠臀部的腫瘤比較；接種于8周齡裸鼠腋下部位與接種于8周齡裸鼠臀部部位的腫瘤比較，生長速度差異沒有統(tǒng)計學(xué)意義(p>0.05)
　　 結(jié)論：
　　 本實驗將不同部位不同周齡裸小鼠移植瘤情況做一比較，得出如下結(jié)論：
　　 1.

9、裸鼠周齡越小，標(biāo)本成瘤率越高，且接種于腋下部位較臀部部位成瘤率高；周齡越大，成瘤率越低，且接種于不同部位的標(biāo)本成瘤率無顯著差別。
　　 2.不論裸鼠周齡大小，接種于臀部部位的腫瘤破潰率大于腋下部位的腫瘤破潰率。研究還發(fā)現(xiàn)：周齡越大的裸鼠，不論腫瘤接種部位如何，瘤體自行軟化消失率越高，但在周齡較小的裸鼠身上，臀部移植瘤自行消失率高于腋下移植部位。
　　 3.不論接種部位如何，周齡越小的裸鼠，移植瘤生長速度越快；但對于相同周