SERINC家族蛋白抑制HIV--1復制的研究.pdf

1、絲氨酸整合因子SERINC（Serine incorporater，Ser）是一種膜蛋白家族，其中家族成員Ser5是最新報道能夠被攜帶到人類免疫缺陷病毒Ⅰ型(HIV-1)病毒粒子中的宿主限制性因子，具有抵抗HIV-1病毒感染性的作用，而HIV-1編碼的輔助蛋白Nef可以拮抗Ser5。但目前Ser5抗病毒活性具體機制還不明確，本課題為內(nèi)源性Ser5在宿主細胞內(nèi)的表達狀況以及Ser5抗病毒的分子機理研究，對艾滋病疫苗及治療方法的開發(fā)具有重要

2、的借鑒意義。本研究首先將Ser家族各成員對HIV-1感染性的抑制效果進行了驗證，結(jié)果顯示只有Ser5能夠明顯抑制HIV-1的感染性。其次通過對Ser5序列的分析及數(shù)據(jù)庫檢索發(fā)現(xiàn)，其具有5個轉(zhuǎn)錄剪接體，分別是Ser5-001、Ser5-004、Ser5-005、Ser5-008a和Ser5-008b。Ser5-001具有10個跨膜區(qū)，而其他轉(zhuǎn)錄剪接體缺乏C末端最后一個跨膜區(qū)。在HIV-1靶細胞的巨噬細胞系、T細胞系、原代外周血單核細胞等不

3、同細胞中利用RT-qPCR技術對內(nèi)源性Ser5表達水平的分析結(jié)果表明，Ser5-001內(nèi)源性表達最強，其mRNA水平比其他轉(zhuǎn)錄剪接體至少高10倍。為了確定Ser5抗病毒活性的關鍵功能域，對Ser5-001從C端根據(jù)其跨膜區(qū)結(jié)構(gòu)進行依次截短，對截短后Ser5的抗病毒活性進行驗證，結(jié)果顯示，去掉最后一個跨膜區(qū)后截短突變體即不具有抗病毒感染性的活性，以上結(jié)果表明Ser5-001 C端第10個跨膜區(qū)對其發(fā)揮抗病毒感染性具有重要作用。另外，利用C