USPIO增強(qiáng)MR活體內(nèi)監(jiān)測(cè)大鼠局部腦缺血再灌注損傷的炎癥反應(yīng).pdf

1、背景與目的:腦缺血是常見(jiàn)的腦血管病，其致殘率高。因此，活體研究腦缺血早期的病理變化對(duì)于診斷、治療措施的選擇、藥物的開發(fā)及療效的評(píng)價(jià)有重要意義。大量實(shí)驗(yàn)證明局部腦缺血－再灌注可引起腦內(nèi)小膠質(zhì)細(xì)胞活化及血源性粒細(xì)胞浸潤(rùn)，這些細(xì)胞在局部聚集并釋放一些炎癥因子加重缺血區(qū)腦組織的損傷，使梗死范圍進(jìn)一步擴(kuò)大，這表明炎癥反應(yīng)在腦缺血－再灌注繼發(fā)性損傷中起重要作用。以往人們研究腦缺血炎癥反應(yīng)的變化通常是在獲得腦缺血模型后處死實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，然后制作病理切片，

2、這不僅需要大量的動(dòng)物，最大的問(wèn)題是不能在同一個(gè)體內(nèi)連續(xù)、動(dòng)態(tài)觀察，針對(duì)腦缺血炎癥反應(yīng)的治療新舉措要求無(wú)創(chuàng)評(píng)價(jià)炎性細(xì)胞的激活、浸潤(rùn)。超微超順性氧化鐵粒子(ultrasmall particles of iron oxide，USPIO)作為單核巨噬細(xì)胞系統(tǒng)(mononuclearphagocytotic system,MPS)特異的MR對(duì)比劑近年來(lái)受到重視，應(yīng)用這種成像技術(shù)可以在活體內(nèi)監(jiān)測(cè)炎癥反應(yīng)，目前國(guó)內(nèi)尚未見(jiàn)此類報(bào)道，本實(shí)驗(yàn)旨在探討應(yīng)

3、用USPIO增強(qiáng)MR在活體內(nèi)動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)局部腦缺血－再灌注損傷炎癥反應(yīng)的變化。 材料與方法:清潔級(jí)雄性SD大鼠36只，月齡4—5月，體重270—320g。隨機(jī)分為兩組：假手術(shù)組(n=6)，模型組(n=30)。模型組再細(xì)分為：氯化四唑(TTC)染色組(n=6)，USPIO注射后第24h、48h、72h MRI觀察組(每組6只)和對(duì)照組(大鼠尾靜脈注射等量的生理鹽水替代USPIO)(n=6)。 參照l(shuí)onga法制作大腦中動(dòng)脈阻塞

4、模型，模型成功后，2h后向外輕提線栓實(shí)現(xiàn)再灌注，再灌注2h后行首次MR掃描，隨后經(jīng)大鼠尾靜脈注射造影劑USPIO(300μmmolFe/kg)，實(shí)驗(yàn)過(guò)程中保持大鼠肛溫在37±1℃。假手術(shù)組不插入線栓，其余步驟同手術(shù)組。分別于注射USPIO后第24h、48h、72h掃描，MR信號(hào)改變采用病變側(cè)信號(hào)/對(duì)側(cè)相應(yīng)區(qū)域信號(hào)計(jì)算方法。每組動(dòng)物在行最后一次掃描后立即過(guò)量麻醉處死，斷頭取腦，標(biāo)本送常規(guī)病理及免疫組化檢查，光鏡觀察。實(shí)驗(yàn)期間動(dòng)物如有死亡，

5、予以補(bǔ)充。所有數(shù)據(jù)采用SPSS 10.0統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行正態(tài)性檢驗(yàn)、方差分析等處理，以均數(shù)士標(biāo)準(zhǔn)差表示，P<0.05視為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)果:模型組缺血區(qū)在T2WI上呈高信號(hào)，T1WI不敏感。TCC染色缺血梗死部位淡染，和正常腦組織(染成紅色)對(duì)比明顯。USPIO T1WI增強(qiáng)缺血區(qū)呈正性強(qiáng)化，表現(xiàn)為高信號(hào)，T2WI增強(qiáng)呈負(fù)性強(qiáng)化，表現(xiàn)為低信號(hào)。USPIO增強(qiáng)掃描的時(shí)間信號(hào)變化規(guī)律為：T1WI增強(qiáng)在24h最明顯(p<0.002)，

6、T2WI增強(qiáng)在48h最明顯(p<0.001)，無(wú)論T1增強(qiáng)還是T2增強(qiáng)均表現(xiàn)為強(qiáng)化范圍逐漸增大的趨勢(shì)，但T1增強(qiáng)較T2增強(qiáng)更敏感，顯示的強(qiáng)化范圍更大，假手術(shù)組和對(duì)照組中信號(hào)無(wú)此變化。MRI和病理對(duì)照研究顯示MRI強(qiáng)化區(qū)組織CD68免疫組化染色見(jiàn)大量增生活躍染成黃色的小膠質(zhì)細(xì)胞/巨噬細(xì)胞，對(duì)照組無(wú)類似改變。普魯士蘭染色顯示藍(lán)染的鐵粒子不僅位于梗死灶周邊巨噬細(xì)胞內(nèi)，還可見(jiàn)于壞死區(qū)。 結(jié)論:1．本研究進(jìn)一步證實(shí)，應(yīng)用USPIO這種巨噬