骨髓增生異常綜合征患者Bid,Bc1-xL的表達(dá)及臨床意義.pdf

1、目的：BH3結(jié)構(gòu)域凋亡蛋白(Bid)是一個(gè)只含BH3結(jié)構(gòu)域的Bcl-2家族成員，有促凋亡功能。完整結(jié)構(gòu)的Bid主要位于細(xì)胞質(zhì)，不表現(xiàn)促凋亡活性。當(dāng)細(xì)胞受凋亡信號(hào)刺激后，活化的caspase-8可以切割肽鏈，去除N末端，形成截短型Bid片段(tBid)。tBid從細(xì)胞質(zhì)轉(zhuǎn)移到線粒體外膜，并結(jié)合Bcl-2樣蛋白抑制其抗凋亡的作用，或促使Bax和Bak（均為Bcl-2家族的成員）發(fā)生寡聚化。Bax和Bak形成寡聚體后能在線粒體膜上形成孔道，或

2、導(dǎo)致線粒體跨膜電位下降，使線粒體的通透性發(fā)生改變，從而誘導(dǎo)釋放細(xì)胞色素C和其他促凋亡分子以促進(jìn)細(xì)胞凋亡。B細(xì)胞淋巴瘤/白血病-xL(Bcl-xL)屬于Bcl-2家族中的Ⅰ類成員，具有抑制細(xì)胞凋亡作用。Bcl-xL的重要功能是穩(wěn)定跨膜電位和減少膜的通透性，抑制線粒體對(duì)細(xì)胞凋亡的誘導(dǎo)信號(hào)和執(zhí)行細(xì)胞凋亡的物質(zhì)的釋放，從而抑制細(xì)胞凋亡。在正常細(xì)胞中，Bcl-xL分布于胞質(zhì)和膜上，在凋亡信號(hào)刺激下，Bcl-xL轉(zhuǎn)移到線粒體外膜和其他細(xì)胞器膜上，在

3、線粒體外膜上可與其他促凋亡蛋白如Bad結(jié)合，或形成離子通道維持線粒體外膜的完整性。Bcl-xL還可通過(guò)多種蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)的相互作用發(fā)揮其抗凋亡的功能。近年來(lái)，對(duì)惡性血液病的發(fā)生、發(fā)展與凋亡關(guān)系的研究比較多，Bid基因在其他系統(tǒng)疾病中的作用的研究也較多，但Bid，Bcl-xL在骨髓增生異常綜合征(MDS)發(fā)生、發(fā)展中的作用研究較少。本研究旨在探討MDS中Bid，Bcl-xL的表達(dá)情況以及Bid，Bcl-xL兩者表達(dá)相關(guān)程度與MDS診斷、治

4、療效果及預(yù)后的關(guān)系，期望為MDS的診斷、防治及預(yù)后提供理論依據(jù)。
　　 方法：
　　 (1)標(biāo)本選自河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院血液科2010年3月至12月間33例新近診斷的MDS患者，男18例，女15例，年齡19至76歲，平均年齡50.4歲。有關(guān)MDS診斷按張之南主編的《血液病診斷及療效標(biāo)準(zhǔn)》第三版確診。MDS分型依據(jù)1999年WHO標(biāo)準(zhǔn)，MDS的危險(xiǎn)度分級(jí)根據(jù)國(guó)際預(yù)后積分系統(tǒng)(IPSS)分為低危和高危（低危：低危和中危-1;

5、高危：中危-2和高危）。根據(jù)第四屆全國(guó)血細(xì)胞學(xué)術(shù)會(huì)議MDS療效標(biāo)準(zhǔn)判斷療效。河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院查體中心健康人員12例做正常對(duì)照組。研究對(duì)象分為3組：①新近診斷的初治MDS組；②治療后MDS組；③正常對(duì)照組。
　　 (2)采集樣本外周血，提取血清，用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測(cè)MDS患者治療前后及正常對(duì)照組的Bid，Bcl-xL表達(dá)水平。(3)所得結(jié)果采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件包處理，符合正態(tài)方差齊的數(shù)據(jù)采用ON

6、E-WAYANOWA做方差分析。不符合正態(tài)方差齊的數(shù)據(jù)采用Mann-Wilcoxon U做非參數(shù)檢驗(yàn)。Bid和Bcl-xL的相關(guān)性通過(guò)Pearson相關(guān)分析，以α=0.05為顯著性檢驗(yàn)水準(zhǔn)。
　　 結(jié)果：
　　 1、新近診斷的33例MDS患者中依據(jù)WHO分型標(biāo)準(zhǔn)，其中包括RA3例，RAS2例，RCMD14例，RCMD-RS1例，RAEB-I10例，RAEB-II3例，并根據(jù)IPSS積分將這33例患者分為低危20例，高危1

7、3例。33例MDS患者中經(jīng)過(guò)治療并可以判定療效的有27例，CR5例，PR9例，NR13例。27例中包括RA2例，RAS2例，RCMD10例，RCMD-RS1例，RAEB-19例，RAEB-II3例。根據(jù)危險(xiǎn)度分為低危15例，高危12例。
　　 2、正常對(duì)照組中Bid，Bcl-xL的表達(dá)水平正常對(duì)照組12例，Bid和Bcl-xL的表達(dá)水平以中位數(shù)表示：分別為8.56(4.66-18.52)ng/L和17.79(8.12-45.78

8、)ng/L。
　　 3、MDS患者治療前后Bid，Bcl-xL的表達(dá)情況新近診斷的MDS組33例治療前Bid，Bcl-xL的表達(dá)水平以中位數(shù)表示：分別為17.84(0.59-53.16)ng/L和30.86(9.31-50.09)ng/L，治療后27例患者Bid，Bcl-xL的表達(dá)水平分別為10.41(1.48-33.16)ng/L和20.77(3.47-34.20)ng/L。MDS患者治療前Bcl-xL的表達(dá)水平高于正常對(duì)照組

9、，治療前Bid的表達(dá)水平和治療后Bcl-xL的表達(dá)水平，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，余差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 4、不同危險(xiǎn)度MDS患者治療前后Bid和Bcl-xL的表達(dá)情況
　　 (1)低危MDS治療前20例患者Bid，Bcl-xL的表達(dá)水平：分別為34.20(26.91-53.16)ng/L和18.69(9.31-32.44)ng/L。低危MDS治療后15例患者Bid，Bcl-xL的表達(dá)水平：分別為15.23(1.48-33

10、.16)ng/L和22.90(13.32-34.19)ng/L。低危治療前后Bid表達(dá)水平均高于正常對(duì)照組，低危治療前Bid表達(dá)水平高于低危治療前Bcl-xL表達(dá)水平和低危治療后Bid表達(dá)水平，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，余差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 (2)高危MDS治療前13例患者Bid，Bcl-xL的表達(dá)水平：分別為2.49(0.59-8.77)ng/L和39.98(30.27-59.09)ng/L，高危MDS治療后12例患者Bid，

11、Bcl-xL的表達(dá)水平：分別為7.05(2.43-14.73)ng/L和18.0(3.47-33.87)ng/L。高危治療前Bid表達(dá)水平低于正常對(duì)照組和高危治療后Bid表達(dá)水平，并低于高危治療前Bcl-xL表達(dá)水平和低危治療前Bid表達(dá)水平，高危治療前Bcl-xL表達(dá)水平高于正常對(duì)照組和低危治療前Bcl-xL表達(dá)水平，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，余差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 5、MDS不同療效的患者治療前后Bid，Bcl-xL的表達(dá)情況<

12、br>　　 (1)達(dá)到CR患者5例，治療前Bid和Bcl-xL的表達(dá)水平分別為33.76(27.54-39.47)ng/L和18.84(14.49-28.95)ng/L，治療后Bid和Bcl-xL的表達(dá)水平分別為9.94(7.35-19.71)ng/L和17.94(3.47-33.28)ng/L。CR患者治療前Bid的表達(dá)水平高于正常對(duì)照組，高于CR患者治療后Bid的表達(dá)水平和治療前Bcl-xL的表達(dá)水平，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，余差異無(wú)統(tǒng)

13、計(jì)學(xué)意義。
　　 (2)達(dá)到PR患者9例，治療前Bid和Bcl-xL的表達(dá)水平分別為32.06(1.84-53.16)ng/L和25.65(9.31-59.09)ng/L，治療后Bid和Bcl-xL的表達(dá)水平分別為11.87(1.48-33.16)ng/L和24.28(19.49-34.19)ng/L。PR患者治療前Bid的表達(dá)水平高于正常對(duì)照組和治療后Bid的表達(dá)水平，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，余差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 (3

14、)NR患者13例，治療前Bid和Bcl-xL的表達(dá)水平分別為2.49(0.59-35.06)ng/L和39.98(19.31-59.10)ng/L，治療后Bid和Bcl-xL的表達(dá)水平分別為10.41(2.43-22.36)ng/L和8.63(3.68-33.87)ng/L。NR患者治療前Bcl-xL的表達(dá)水平高于正常對(duì)照組和CR、PR治療前，Bcl-xL的表達(dá)水平，并高于治療后Bcl-xL的表達(dá)水平和治療前Bid的表達(dá)水平，差異有統(tǒng)計(jì)

15、學(xué)意義，余差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 6、Bid與Bcl-xL的相關(guān)關(guān)系：Bid與Bcl-xL的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)。
　　 結(jié)論：
　　 1、初治MDS患者Bcl-xL表達(dá)升高，Bcl-xL可能參與MDS的發(fā)病過(guò)程，并在其中發(fā)揮抑制凋亡作用。
　　 2、Bid主要在低危MDS發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮作用，在高危MDS的發(fā)病過(guò)程中Bcl-xL的抑凋亡作用占優(yōu)勢(shì)，Bid的促凋亡作用被抑制。治療后MDS患者Bid、Bcl-xL的

16、表達(dá)水平發(fā)生動(dòng)態(tài)變化。Bid和Bcl-xL可以用來(lái)作為評(píng)估疾病變化的監(jiān)測(cè)指標(biāo)。
　　 3、達(dá)到CR的患者治療前Bid表達(dá)水平高于PR、NR的患者，說(shuō)明雖然在MDS發(fā)生時(shí)Bid存在過(guò)表達(dá)，但這種過(guò)表達(dá)可能代表預(yù)后良好。NR的患者治療前Bcl-xL表達(dá)水平較CR、PR患者升高，Bcl-xL表達(dá)水平升高可能提示患者預(yù)后不良。
　　 4、MDS患者Bid與Bcl-xL的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)，推測(cè)Bid與Bcl-xL是通過(guò)制約彼此的作用在