四川西部雅安山區(qū)茄子黃萎病菌種群結(jié)構(gòu)研究.pdf

1、茄子黃萎病是世界性病害，也是我國和四川茄子生產(chǎn)中的三大病害之一。為了解四川西部雅安山區(qū)茄子黃萎病菌的種群組成情況，為病害的測報、防治和抗病育種提供依據(jù)，我們于2004年-2005年在四川西部雅安山區(qū)5區(qū)(縣)43個茄子生產(chǎn)地采集茄子黃萎病標樣，經(jīng)組織分離和單孢分離共獲得66個輪枝孢屬的菌株(有一株來自棉花)，對它們進行了種類鑒定、致病性和營養(yǎng)體親和性的研究，從而明確了引致四川西部雅安山區(qū)茄子黃萎病病原菌的種群結(jié)構(gòu)，其結(jié)果如下：

2、黃萎病菌的分類采用Isace和Li方法，主要根據(jù)黃萎病菌產(chǎn)微菌核情況、25℃及30℃于PDA上的生長情況、茄莖組織上分生孢子梗基部顏色及應(yīng)用PCR技術(shù)擴增病原菌基因組DNA等方法進行分類鑒定。測定表明：66個供試菌株的分生孢子梗呈無色、多輪分枝，每輪有3-4根小枝；均能產(chǎn)生微菌核；在茄莖組織上分生孢子?；款伾菬o色；供試菌于PDA平板上，在30℃上生長速度非常緩慢，重新置于25℃培養(yǎng)又呈快速生長狀態(tài)；采用分子生物學(xué)技術(shù)進行鑒定，用特異

3、引物對供試菌株基因組DNA擴增，均出現(xiàn)140bp，屬大麗輪枝菌的特異片段。以上結(jié)果表明，66個供試輪枝菌菌株屬于大麗輪枝菌(VerticilliumdahliaeKleb)。 為了解四川西部雅安山區(qū)茄子黃萎病菌的致病性分化，根據(jù)菌株地理來源及田間樣本癥狀表現(xiàn)，選取代表菌株47個(含1株來自棉花上的菌株，Ym1)，另有3個參比菌(JY2、JY3，JY4)進行了致病性分化測定。在茄苗3片真葉時，用玉米砂培養(yǎng)基培養(yǎng)黃萎病菌作為接種體，

4、對茄子進行根部接種。結(jié)果表明：45d剖莖檢查，所有菌株均引起莖部維管束不同程度的變色，表明所有供試菌株均能致病。根據(jù)21d發(fā)病率、30d病情指數(shù)和45d枯死率可把50個供試菌劃分為Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ型三種致病力類型：Ⅰ型有3個菌株，致病力最強，都引起嚴重落葉枯死癥狀，占供試菌的6％；Ⅱ型的13個菌株能引起茄株零星枯死及落葉，屬中等致病性，占供試菌的26％；Ⅲ型有34個菌株，致病力最弱，占供試菌株的68％，其中Y9等12個菌株雖不引起明顯外部癥狀

5、，卻可侵染莖部維管束并引起變色，應(yīng)是極弱致病力，其余菌株均能引起茄葉呈典型掌狀黃斑，但不出現(xiàn)枯死及落葉癥狀。以上結(jié)果表明，菌株間存在致病性分化現(xiàn)象。 對50株茄子大麗輪枝菌及4株棉花大麗輪枝菌，進行了營養(yǎng)體親和性測定，研究了培養(yǎng)基種類對硝酸鹽營養(yǎng)缺陷型突變體篩選的影響；在篩選獲得突變體基礎(chǔ)上進行了親和性測定和類型劃分，結(jié)果是：利用KPS、MMC、WAC和CMC培養(yǎng)基(氯酸鉀濃度3％)篩選硝酸鹽營養(yǎng)缺陷型突變體，WAC培養(yǎng)基得到的

6、突變體頻率比其它三種培養(yǎng)基高。用WAC培養(yǎng)基，對54個大麗輪枝菌篩選突變體，在篩選出的2063個突變體中，1934個為Nit1(93.74％)；NitM有121個(5.84％)；Nitx有4個(0.21％)；Nit3有4個(0.21％)。T1和M5兩個菌株未得到NitM突變體，52個菌株中同時篩選到Nit1及NitM突變體的菌株有23個菌株，被鑒定為異核體自身親和性菌株，29個菌株被鑒定為自身不親和。各菌株間Nit1和NitM突變體作親