2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語(yǔ)一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁(yè)
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1、目的: 探討鋅預(yù)處理在Cr(VI)誘導(dǎo)的HepG2細(xì)胞損傷中的作用以及可能的機(jī)制。 方法: 以HepG2細(xì)胞作為Cr(VI)毒性的細(xì)胞模型,采用MTT法檢測(cè)細(xì)胞毒性,LDH活性評(píng)價(jià)細(xì)胞膜的損傷,姬姆薩染色觀察細(xì)胞形態(tài),SDS-蛋白酶K法檢測(cè)DPC,熒光光度法分析DNA斷裂,觀察25~100umol/L劑量的Cr(VI)染毒6h對(duì)HepG2細(xì)胞的毒性、形態(tài)學(xué)改變以及DNA損傷的影響。銀飽和法檢測(cè)鋅誘導(dǎo)HepG2細(xì)胞

2、MT合成的能力。選擇80umol/L鋅預(yù)處理24h事先誘導(dǎo)MT的合成,比較鋅預(yù)處理加Cr(VI)組與單純Cr(VI)處理組細(xì)胞毒性、形態(tài)學(xué)改變和DNA損傷等檢測(cè)指標(biāo)的差異,評(píng)價(jià)鋅預(yù)處理在Cr(VI)誘導(dǎo)的細(xì)胞損傷中的作用。體外制備MT粗提組分以及放射菌素D和熱休克處理干預(yù)措施初步研究鋅預(yù)處理誘導(dǎo)的MT在Cr(VI)細(xì)胞損傷中的可能作用。 結(jié)果: 1.在25~1001xmol/L的劑量范圍內(nèi)染毒6h,Cr(VI)抑制了 H

3、epG2細(xì)胞的生長(zhǎng)與增殖,損傷了細(xì)胞膜的完整性,促進(jìn)了DPC和DNA斷裂的形成,顯微鏡下觀察可見(jiàn)明顯的形態(tài)學(xué)異常,細(xì)胞數(shù)量明顯減少,貼壁能力降低和折光性減弱,細(xì)胞邊界不清楚,部分細(xì)胞核皺縮,染色質(zhì)凝聚,以及少量細(xì)胞出現(xiàn)核碎裂和核溶解等病理形態(tài)學(xué)改變。Cr(VI)誘導(dǎo)的HepG2細(xì)胞損傷有明顯的劑量一效應(yīng)關(guān)系,隨染毒劑量的增加,上述改變逐漸明顯,在100umol/L Cr(VI)的作用下,可出現(xiàn)明顯的細(xì)胞壞死和凋亡。Cr(VI)能明顯的誘

4、導(dǎo)HepG2細(xì)胞的DNA損傷,其中DPC出現(xiàn)較早,變化幅度較大,是Cr(VI)誘導(dǎo)DNA損傷的重要的類(lèi)型。 2.鋅能誘導(dǎo)HepG2細(xì)胞MT的合成,在50-100umol/L鋅預(yù)處理24h的劑量范圍內(nèi)與MT誘導(dǎo)合成存在一定的劑量依賴(lài)性,并且對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)與增殖無(wú)明顯影響,當(dāng)鋅在200umol/L劑量由于鋅對(duì)細(xì)胞的毒性作用可抑制MT的合成而顯著降低細(xì)胞內(nèi)MT的含量。 3.80umol/L鋅預(yù)處理24h能夠降低Cr(VI)誘導(dǎo)

5、的細(xì)胞毒性和DNA損傷作用,在25-50μmol/L的Cr(VI)劑量范圍內(nèi),鋅預(yù)處理的保護(hù)效應(yīng)較明顯,但在100μmol/LCr(VI)的作用下,鋅預(yù)處理的保護(hù)效應(yīng)基本消失。顯微鏡下觀察的鋅預(yù)處理細(xì)胞的生長(zhǎng)方式、細(xì)胞數(shù)量和形態(tài)學(xué)異常也較單純Cr(VI)有不同程度的改善,但也主要見(jiàn)于25-50μmol/LCr(VI)染毒劑量組。 4.HepG2細(xì)胞用5μg/ml的放線菌素D預(yù)處理基本阻斷了鋅預(yù)處理對(duì)不同劑量Cr(VI)誘導(dǎo)的細(xì)胞

6、損傷的保護(hù)效應(yīng),細(xì)胞存活率、LDH的漏出以及DPC等細(xì)胞損傷檢測(cè)指標(biāo)與單純?nèi)綜r(VI)組無(wú)明顯差別。 5.43℃2h的熱休克處理對(duì)Cr(VI)誘導(dǎo)的細(xì)胞毒性無(wú)明顯影響,熱休克處理細(xì)胞在10~501μmol/L,Cr(VI)染毒6h的條件下存活率與相應(yīng)非熱處理細(xì)胞無(wú)明顯差異。 結(jié)論: 1.Cr(VI)對(duì)HepG2細(xì)胞具有明顯的毒性,DPC的形成是Cr(VI)誘導(dǎo)DNA損傷的重要類(lèi)型,可作為較敏感的生物學(xué)效應(yīng)標(biāo)志。

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