構(gòu)建組織工程管狀軟骨修復(fù)氣管節(jié)段性缺損.pdf

1、目的：⑴觀察1％聚乳酸的聚乳酸/聚乙醇酸共紡纖維是否適合于組織工程軟骨構(gòu)建。⑵選擇兔頸部氣管旁的胸骨舌骨肌做為載體組織，通過乳膠灌注來探查兔胸骨舌骨肌的血運(yùn)解剖特點(diǎn)。⑶運(yùn)用該復(fù)合組織瓣實(shí)際修復(fù)兔節(jié)段性氣管缺損，探討手術(shù)方式及術(shù)后檢測修復(fù)情況。 方法：①PLA/PGA80mg材料均勻地纏繞在硅膠模具(直徑7mm，長20mm)上形成管形支架材料。從兔耳廓軟骨分離得到軟骨細(xì)胞，在體外培養(yǎng)擴(kuò)增后接種于支架材料，評(píng)估炎癥反應(yīng)程度和軟骨形成

2、情況。②選擇健康成年新西蘭白兔(n=6)，麻醉處死后剖開腹腔，分離出腹主動(dòng)脈和下腔靜脈，剪開下腔靜脈放血，向腹主動(dòng)脈內(nèi)先推注生理鹽水清洗血管系統(tǒng)，然后推注紅色乳膠灌注，等待48小時(shí)后乳膠凝固，進(jìn)行頸部解剖探查。③在實(shí)驗(yàn)組(n=10)，將經(jīng)培養(yǎng)擴(kuò)增的自體兔耳廓軟骨細(xì)胞接種于PLA/PGA圓筒形支架上形成細(xì)胞-材料復(fù)合物，經(jīng)體外培養(yǎng)14天后植入兔胸骨舌骨肌內(nèi)，4周后預(yù)制成含有管狀軟骨的復(fù)合組織瓣。 結(jié)果：⑴體外培養(yǎng)2天后軟骨細(xì)胞已能

3、較穩(wěn)定地粘附在PLA/PGA材料纖維上。⑵與人類不同，兔胸骨舌骨肌血供直接由頸總動(dòng)脈主干分支供應(yīng)，一般有2支，這2個(gè)分支都偏舌骨端。這兩支的位置比較固定，有時(shí)有一支會(huì)較粗，會(huì)再分出數(shù)支，其中一支供應(yīng)同側(cè)胸骨舌骨肌，另幾支供近鄰近的其它結(jié)構(gòu)。其靜脈分支一般與動(dòng)脈分支伴行。⑶實(shí)驗(yàn)組動(dòng)物氣管缺損修復(fù)術(shù)后可以自主呼吸，組織工程氣管與周圍組織整合良好，工程化軟骨一直保持軟骨組織特征，在術(shù)后1～2周時(shí)管腔被一層扁平上皮爬行覆蓋，經(jīng)過6-8周這層上皮

4、逐步轉(zhuǎn)化為與正常氣道上皮類似的假復(fù)層纖毛柱狀上皮。 結(jié)論：①含1％PLA的PLA/PGA共紡纖維軟骨細(xì)胞粘附性好，降解時(shí)間與軟骨形成時(shí)間匹配，是構(gòu)建組織工程軟骨合適的支架材料。②軟骨細(xì)胞-PLA/PGA復(fù)合物直接植入體內(nèi)會(huì)引起較為強(qiáng)烈的炎癥反應(yīng)，主要集中在植入后早期，以固有免疫反應(yīng)為主。在后期炎癥反應(yīng)會(huì)隨材料的降解逐漸消退，但遺留的纖維結(jié)締組織混雜于工程軟骨之中，新生軟骨質(zhì)量較差。③經(jīng)過2周體外預(yù)培養(yǎng)，軟骨細(xì)胞-PLA/PGA復(fù)

5、合物已形成一定量的軟骨組織，此時(shí)植入體內(nèi)炎癥反應(yīng)較直接植入組明顯減輕，構(gòu)建的組織工程管狀軟骨的質(zhì)量明顯提高，接近正常氣管軟骨。④通過乳膠灌注發(fā)現(xiàn)兔的胸骨舌骨肌的血供主要是靠頸總動(dòng)脈近舌骨一側(cè)的兩個(gè)直接分支供應(yīng)，分離肌肉瓣時(shí)要注意保護(hù)舌骨端的血管，在此前提下，該肌肉瓣可以大部分游離以便在較大的范圍內(nèi)移動(dòng)和翻轉(zhuǎn)。⑤在兔胸骨舌骨肌內(nèi)構(gòu)建的管狀軟骨與皮下構(gòu)建的質(zhì)量相同，而且預(yù)制的復(fù)合組織瓣在下一步的帶蒂修復(fù)中為管狀軟骨提供可靠的血供保證。⑥前兩