東方田鼠抗血吸蟲抗性相關(guān)靶基因(血清篩選)的研究.pdf

1、血吸蟲病是世界性分布的、危害最為嚴(yán)重的人畜共患寄生蟲病之一。東方田鼠對(duì)血吸蟲具有天然抗性。探索東方田鼠抗日本血吸蟲機(jī)理，篩選東方田鼠抗日本血吸蟲抗性相關(guān)靶基因，對(duì)研制抗日本血吸蟲疫苗和治療藥物具有重要借鑒意義。 劉金明組課題組在前期研究中利用東方田鼠血清篩選日本血吸蟲成蟲噬菌體展示cDNA文庫(kù)，獲得10個(gè)陽(yáng)性克隆，為尋找其中具有開發(fā)成疫苗潛力的抗原編碼基因，為研制疫苗創(chuàng)造條件。本文對(duì)其中的8個(gè)噬菌體克隆的免疫預(yù)防效果進(jìn)行觀察，并

2、對(duì)具有較高保護(hù)效果的鋅指蛋白編碼基因進(jìn)行克隆、表達(dá)和重組蛋白免疫預(yù)防效果的研究。 以8個(gè)噬菌體克隆單獨(dú)或聯(lián)合免疫BALB/c小鼠，和空白對(duì)照組相比，展示日本血吸蟲鋅指蛋白的1號(hào)噬菌體克隆免疫組在兩次實(shí)驗(yàn)中分別獲得了32.10％和31.25％的減蟲率、61.14％和47.31％的肝臟減卵率，蟲體合抱率分別由92.59％、57.39％下降到69.09％、41.03％；其它噬菌體克隆單獨(dú)免疫組或聯(lián)合免疫組在第一次實(shí)驗(yàn)中獲得了8.02％

3、-32.72％的減蟲率和40.19％-69.53％的減卵率，但在第二次實(shí)驗(yàn)中未能得到驗(yàn)證。 以RT-PCR技術(shù)從血吸蟲成蟲mRNA中成功克隆日本血吸蟲鋅指蛋白編碼基因(我們將其命名為Sjznf1)的全長(zhǎng)ORF序列，其ORF全長(zhǎng)1014bp，編碼337個(gè)氨基酸，與GenBank登陸號(hào)為AY222909和E2000159的日本血吸蟲鋅指蛋白基因序列比對(duì)，核苷酸同源性分別為99.7％和99.4％；氨基酸序列同源性分別為99.4％和98