三七總皂甙對肺缺血再灌注損傷保護(hù)效應(yīng)及其機(jī)制.pdf

1、目的：探討三七總皂甙對肺缺血再灌注損傷保護(hù)作用及其可能的機(jī)制. 方法：健康日本大耳白兔隨機(jī)分成3組,每組10只,假手術(shù)組(sham operaion,S組),肺缺血再灌注組(ischemia reperfusion,IR組),缺血再灌注+三七總皂甙組(panax notoginseng saponinS,PNS組).麻醉后左側(cè)開胸,游離肺門,穿過阻斷帶,復(fù)制在體原位單肺缺血再灌注模型.S組左肺門過阻斷帶后不阻斷肺門;IR組左肺門

2、過阻斷帶后阻斷左肺門缺血1h,松開阻斷帶再灌注3h:PNS組分別在缺血前l(fā)Omin和再灌注前10min靜注三七總皂甙注射液,其余同IR組.各組在缺血前、缺血后、再灌注1h、2h和3h分別經(jīng)頸總動脈抽血檢測黃嘌呤氧化酶(XO)和超氧化物歧化酶(SOD)活力,丙二醛(MDA)含量,實驗結(jié)束時取左肺組織測定髓過氧化物酶(MPO)活性、肺組織濕干重比(W/D)的測定:并采用免疫組化方法測定肺光鏡觀察肺組織形態(tài)學(xué)改變及計數(shù)肺泡損傷率(IQA);電

3、鏡觀察細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的改變.應(yīng)用免疫組化法檢測肺組織環(huán)氧酶-1(COX-1)、COX-2蛋白表達(dá),原位雜交法檢測肺組織COX-1mRNA和COX-2mRNA表達(dá)的變化. 結(jié)果： 1.血漿XO活力的變化:IR組、PNS組血漿XO活力均隨著缺血和再灌注時間的延長而逐漸上升,但PNS組比IR組上升緩慢. 2.血漿SOD活力的變化:IR組血漿SOD活力隨缺血和再灌注時間的延長而逐漸下降;PNS組這種下降的程度較為緩和.

4、 3.血漿MDA含量的變化:IR組、PNS組血漿MDA含量均隨缺血和再灌注時間的延長而逐漸上升,但PNS組比IR組上升緩慢. 4.肺組織MPO含量的變化:IR組肺組織MPO活性較S組和PNS組有顯著升高(P(0.01);PNS組與IR組比較明顯下降(P(0.01). 5.肺濕干重比與肺泡損傷率:IR組明顯高于S組(P(0.01),PNS組雖然較S組為高,但明顯低于IR組(P<0.01). 6.光鏡觀察:S組肺

5、間質(zhì)及肺泡結(jié)構(gòu)保持完整,無明顯受損,未見明顯炎性細(xì)胞;IR組可見肺不張伴肺氣腫,肺間質(zhì)增寬水腫,炎癥細(xì)胞浸潤,肺泡內(nèi)可見較多紅細(xì)胞滲出,損傷明顯;PNS組肺間質(zhì)水腫程度減輕,炎癥細(xì)胞浸潤減少,肺泡內(nèi)紅細(xì)胞滲出減少,肺泡較完整. 7.電鏡觀察:S組毛細(xì)血管,肺泡Ⅰ型,Ⅱ型上皮結(jié)構(gòu)正常.IR組肺內(nèi)毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞腫脹,可見核染色質(zhì)聚集并靠核膜周邊分布,胞核固縮傾向,核間隙增大,Ⅰ型肺泡上皮細(xì)胞內(nèi)吞飲小泡較少,Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞表面微絨

6、毛減少,線粒體腫脹,板層小體稀少,出現(xiàn)較多空泡,肺泡隔水腫,肺泡隔及毛細(xì)血管內(nèi)炎癥細(xì)胞附壁,以中性粒細(xì)胞為主.與IR組作對比觀察,PNS組毛細(xì)血管和肺泡結(jié)構(gòu)有所改善,毛細(xì)血管內(nèi)炎癥細(xì)胞減少,染色質(zhì)分布較均勻,Ⅰ型肺泡上皮細(xì)胞內(nèi)吞飲小泡較多,Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞表面微絨毛及板層小體增多,肺泡隔輕度水腫. 8.免疫組化和原位雜交:工R組、PNS組肺組織COX-2蛋白和COX-2mRNA表達(dá)皆明顯高于S組(P<0.01),而PNS組與IR