NF-κB抑制劑在雌激素調(diào)節(jié)BSEP及NTCP表達(dá)中的作用.pdf

1、目的：研究不同濃度17β雌二醇(E2)對(duì)L-02人正常肝細(xì)胞膽鹽輸出泵(BSEP)及鈉-?；悄懰猁}共轉(zhuǎn)運(yùn)多肽(NTCP)表達(dá)的影響以及核因子-κB(NF-κB)抑制劑吡咯烷二硫氨基甲酸鹽(PDTC)在雌激素調(diào)節(jié)肝細(xì)胞BSEP及NTCP表達(dá)中的作用。
　　 方法：采用體外培養(yǎng)人肝細(xì)胞株（L-02)，以相同濃度雌激素作用不同時(shí)間，不同濃度雌激素作用相同時(shí)間，以得出最適誘導(dǎo)時(shí)間及濃度。隨后以雌激素作用組細(xì)胞為雌激素對(duì)照組，以不同濃度P

2、DTC聯(lián)合雌激素誘導(dǎo)組為實(shí)驗(yàn)組，誘導(dǎo)24小時(shí)候后，采集孔內(nèi)培養(yǎng)基檢測(cè)其中膽汁酸濃度，應(yīng)用逆轉(zhuǎn)錄-PCR(RT-PCR)方法檢測(cè)肝細(xì)胞表面BSEP及NTCPmRNA的含量。
　　 結(jié)果：(1)雌激素作用后6h、12h、18h、24h、30h及36h時(shí)BSEP及NTCP表達(dá)較對(duì)照組降低，但6-24h各組間膽汁酸變化無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，24h和30h組間膽汁酸濃度變化有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，30h和36h之間沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)

3、意義(P>0.05)。(2)不同濃度雌激素作用肝細(xì)胞相同時(shí)間(24h)，生理濃度雌激素時(shí)膽汁酸較空白對(duì)照無明顯降低，BSEP及NTCP表達(dá)較正常對(duì)照無明顯下降，無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；高濃度雌激素組(100，500nmol/L)膽汁酸濃度、BSEP及NTCP表達(dá)較對(duì)照組及生理濃度雌激素組下降(P<0.05)，且各組間比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，且與濃度呈量效依賴關(guān)系(R=-0.889，R=0.884)。1000nmol/L雌激素作用組與50

4、0nmol/L雌激素作用組之間膽汁酸濃度、BSEP及NTCP表達(dá)無明顯變化，無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。(3)PDTC聯(lián)合雌激素作用組膽汁酸濃度、BSEP及NTCP表達(dá)較單獨(dú)雌激素組明顯升高，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，PDTC聯(lián)合雌激素作用組各組間結(jié)果有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
　　 結(jié)論：(1)生理濃度雌激素不引起B(yǎng)SEP及NTCP表達(dá)下降，高于生理濃度雌激素可引起B(yǎng)SEP及NTCP表達(dá)下降，且呈劑量依賴關(guān)系。(2)