五味子正丁醇萃取物對(duì)去卵巢小鼠迷宮學(xué)習(xí)和海馬CA1區(qū)突觸形態(tài)的影響.pdf

1、雌激素水平高低與學(xué)習(xí)記憶相關(guān)，婦女絕經(jīng)后會(huì)出現(xiàn)學(xué)習(xí)記憶下降。流行病學(xué)調(diào)查顯示，絕經(jīng)期婦女阿爾茨海默癥（Alzheimer’s disease，AD）的患病率高于男性。雌激素替代療法（Estrogen replacement therapy，ERT）可以改善絕經(jīng)婦女的認(rèn)知功能和減低AD癥的發(fā)生，然而其卻帶來(lái)一些副作用，如可增加子宮內(nèi)膜癌、乳腺癌的發(fā)病率，這是目前制約ERT 在臨床上應(yīng)用的一個(gè)主要原因。因此，從天然產(chǎn)物中尋找一類具有雌激素樣

2、作用的替代物受到越來(lái)越多的關(guān)注。研究發(fā)現(xiàn)，五味子具有改善學(xué)習(xí)記憶的作用。本室的前期工作指出五味子具有改善去卵巢動(dòng)物學(xué)習(xí)記憶的功效，其有效成分主要集中于五味子正丁醇萃取物中，但其改善學(xué)習(xí)記憶的相關(guān)機(jī)制仍不十分清楚。
　　 目的：
　　 本實(shí)驗(yàn)使用去卵巢小鼠建立學(xué)習(xí)記憶障礙模型，探討五味子正丁醇萃取物對(duì)學(xué)習(xí)障礙的改善作用及其相關(guān)機(jī)制，為臨床治療絕經(jīng)后婦女的認(rèn)知障礙提供理論依據(jù)。
　　 方法：
　　 62只健康

3、雌性小鼠隨機(jī)分為5組：①假手術(shù)組（Sham），n=14；②去卵巢組（OVX），n=14；③去卵巢+苯甲酸雌二醇（EB）組，n=10；④去卵巢+1g生藥/ml五味子正丁醇萃取物（LW）組，n=12；⑤去卵巢+1.5 g生藥/ml五味子正丁醇萃取物（HW）組，n=12。術(shù)后六周根據(jù)分組情況灌胃相應(yīng)藥物，EB組小鼠每次每只皮下注射20μg苯甲酸雌二醇，隔天進(jìn)行；LW組給予1g生藥/ml五味子正丁醇萃取物，劑量為0.4mL·d-1（相當(dāng)于原生藥

4、劑量0.4 g·d-1），HW組給予1.5g生藥/ml五味子正丁醇萃取物，劑量為0.4mL·d-1（相當(dāng)于原生藥劑量0.6g·d-1），各對(duì)照組則灌胃等容積的蒸餾水，分上下午進(jìn)行。給藥20d后，進(jìn)行Y迷宮行為訓(xùn)練，持續(xù)8d，行為訓(xùn)練期間繼續(xù)給藥。記錄每天的正確反應(yīng)率、全組達(dá)標(biāo)率及達(dá)學(xué)會(huì)標(biāo)準(zhǔn)所需的訓(xùn)練次數(shù)。
　　 在不同時(shí)間階段及不同分組中分別隨機(jī)選取小鼠進(jìn)行海馬CA1區(qū)突觸形態(tài)觀察：①術(shù)后三天從Sham組隨機(jī)取兩只小鼠進(jìn)行電鏡觀

5、察；②術(shù)后六周從Sham組和OVX組隨機(jī)各取2只小鼠進(jìn)行電鏡觀察；③給藥結(jié)束后從OVX組和HW組中隨機(jī)各取兩只小鼠進(jìn)行電鏡觀察。觀察指標(biāo)包括突觸面密度（Sv）、突觸數(shù)密度（Nv）、突觸活性區(qū)平均面積、PSD厚度、突觸曲面率和穿孔突觸百分率。
　　 實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下：
　　 1、Y型迷宮學(xué)習(xí)結(jié)果：OVX組小鼠的正確反應(yīng)率和全組達(dá)標(biāo)率均明顯低于Sham組（P<0.01，<0.05），全組達(dá)標(biāo)率為60％，低于Sham組的100％；

6、OVX組達(dá)標(biāo)小鼠所需訓(xùn)練次數(shù)為63.33±19.66，與Sham組的53.33±19.89比較，沒(méi)有顯著性差異（P>0.05）。與OVX組比較：EB組和HW組的正確反應(yīng)率和達(dá)標(biāo)率均顯著提高（P<0.01，<0.05），全組達(dá)標(biāo)率分別為90％和100％；EB組和HW組達(dá)標(biāo)小鼠所需的訓(xùn)練次數(shù)分別為70±10.95和60±18.86，與OVX組比較均無(wú)顯著差異（P>0.05）。與OVX組相比較：LW組的正確反應(yīng)率顯著提高（P<0.01，<0.

7、05），但全組達(dá)標(biāo)率和達(dá)標(biāo)小鼠所需訓(xùn)練次數(shù)分別為80％和60±21.38，與對(duì)照組比較，沒(méi)有顯著性差異（P>0.05）。
　　 2、海馬CA1區(qū)突觸形態(tài)的結(jié)果：①六周后，Sham組小鼠海馬CA1區(qū)的Sv和Nv較六周前的顯著增大（P<0.01），而突觸活性區(qū)平均面積、PSD厚度、突觸曲面率和穿孔突觸百分率則沒(méi)有顯著性變化（P>0.05）。②與Sham組比較，OVX六周后小鼠海馬CA1區(qū)的Sv、Nv和PSD厚度顯著降低（P<0.01

8、），突觸活性區(qū)平均面積顯著升高（P<0.01）；此外，突觸曲面率和穿孔
　　 突觸百分率有所下降，但沒(méi)有顯著性差異（P>0.05）。而OVX十周后小鼠海馬CA1區(qū)的Sv、Nv、PSD厚度、突觸活性區(qū)平均面積、突觸曲面率和穿孔突觸百分率較去卵巢六周小鼠均沒(méi)有顯著性差異（P>0.05）。③高劑量的五味子正丁醇萃取物明顯提高去卵巢小鼠海馬CA1區(qū)的Sv、Nv和PSD厚度，降低突觸活性區(qū)平均面積，呈極顯著性差異或顯著性差異（P<0.01

9、，P<0.05）；此外，突觸曲面率和穿孔突觸百分率也有所上升，但無(wú)顯著性差異（P>0.05）。
　　 結(jié)論：
　　 1、去卵巢導(dǎo)致小鼠學(xué)習(xí)能力減低，而不同劑量的五味子正丁醇萃取物能顯著提高去卵巢小鼠的學(xué)習(xí)能力，以0.6g原生藥·d-1的劑量效果為好。
　　 2、小鼠去卵巢后其海馬CA1區(qū)的突觸面密度、突觸數(shù)密度和PSD厚度均顯著減少，突觸平均面積顯著提高，這種變化在去卵巢六周時(shí)已達(dá)穩(wěn)定。
　　 3、五味子