彩色多普勒超無所忌憚對兔腎缺血再灌注后腎動脈血流動力學(xué)變化的評價及其與腎小管上皮細胞Bcl-2表達關(guān)系的研究.pdf

1、目的:運用彩色多普勒超聲檢測兔腎缺血再灌注損傷后腎動脈血流動力學(xué)變化,分析其與腎小管上皮Bcl-2表達的相關(guān)性,探討彩色多普勒超聲評價腎缺血再灌注損傷程度的價值。
　　 方法:建立兔腎缺血再灌注模型,56只體重1.8—2.4kg的日本大白兔隨機分為三組:正常對照組(control組)8只,缺血再灌注組(I／R組)24只,假手術(shù)組(S組)24只。缺血再灌注組在麻醉后,開腹,切除右腎,夾閉左腎動脈1h后恢復(fù)血供,根據(jù)再灌注時間點不同

2、分為2h、8h、24h亞組.假手術(shù)組僅麻醉、開腹、分離腎動脈,不阻斷血流；根據(jù)根據(jù)保留左腎時間分為2h、8h、24h三個亞組。各組動物按預(yù)定時間點探測腎動脈的血流動力學(xué)變化(Vmax、Vd、Tamax、PI、RI),取腎組織后處死兔子。用石蠟包埋切片,HE染色分析腎組織病理損傷程度,采用免疫組化(SABC)法檢測腎小管中Bcl-2蛋白的表達水平。運用Image Plus Pro6.0圖像分析軟件進行分析,計算陽性表達細胞的平均光密度值。

3、
　　 結(jié)果:1.缺血再灌注后腎動脈血流動力學(xué)變化:與正常對照組、假手術(shù)各亞組分別比較,再灌注2h亞組腎主動脈、段動脈、葉間動脈的Vmax、Vd、Tamax、PI、RI變化均無明顯差異(P>0.05)；與正常對照組、假手術(shù)各亞組分別比較,再灌注8h亞組腎主動脈Vmax、Vd、Tamax、PI、RI變化均無明顯差異(P>0.05),段動脈、葉間動脈均出現(xiàn)RI增大(P<0.05)；與正常對照組、假手術(shù)各亞組分別比較,再灌注24h亞組

4、腎主動脈、段動脈、葉間動脈均出現(xiàn)Vmax升高、PI及RI增大(P<0.05),而Vd及Tamax變化無明顯差異(P>0.05)。2.腎組織的病理變化:假手術(shù)組腎小管均未見明顯病變。缺血再灌注后2h、8h、24h時腎小管出現(xiàn)不同程度的上皮細胞腫脹、管腔擴張,部分細胞內(nèi)可見空泡形成,24時腎小管損傷最重,可見大量壞死脫落細胞,間質(zhì)炎性細胞浸潤。3.腎組織Bcl-2的表達:假手術(shù)組腎小管上皮Bcl-2呈弱陽性表達,隨著保留左腎的時間延長,分為

5、2h、8h、24h三個時間點,平均光密度值分別為0.2487±0.0232、0.2516±0.0347、0.2613±0.0414,各時間點之間Bcl-2表達的平均光密度值無明顯差異；缺血再灌注后Bcl-2的表達上升,主要表達于外髓及遠曲小管,明顯較近曲小管強,隨著缺血再灌注時間延長表達范圍增加。缺血再灌注組分為2h、8h、24h三個時間點,Bcl-2表達平均光密度值分別為0.2757±0.0321、0.2833±0.0214、0.33

6、12±0.0523均高于假手術(shù)組的各對應(yīng)組,并隨著缺血再灌注時間延長而逐漸上升,再灌注24h時達高峰,說明Bcl-2蛋白隨著缺血再灌注損傷的加重表達增加。4.腎主動脈、段動脈、葉間動脈的Vmax、PI、RI與Bcl—2的表達有直線正相關(guān)性,其中以各級動脈的RI值和葉間動脈的指標(biāo)相關(guān)性最高。
　　 結(jié)論:在兔腎缺血再灌注實驗中,彩色多普勒超聲能實時定量監(jiān)測兔缺血再灌注損傷后24小時內(nèi)的腎動脈血流動力學(xué)變化；缺血再灌注后Bcl-2的