蜚蠊共附生放線菌的分離、活性篩選和次級(jí)代謝產(chǎn)物研究.pdf

1、天然產(chǎn)物是藥物的重要來源。許多常用的臨床藥物均來自于微生物次級(jí)代謝產(chǎn)物。其中放線菌(Actinomycetes)在產(chǎn)生抗生素方面具有獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)，大約75％的抗生素都是由放線菌產(chǎn)生。從動(dòng)物共附生微生物可以分離到許多結(jié)構(gòu)新穎，生物活性多樣的化合物。而昆蟲共附生放線菌及其次級(jí)代謝產(chǎn)物的研究是一個(gè)新的領(lǐng)域。有可能對(duì)新藥的研究及解決抗藥性問題起到巨大的推動(dòng)作用。 本論文對(duì)采集自廈門大學(xué)學(xué)生宿舍的蜚蠊進(jìn)行體內(nèi)(分為腸道和其他內(nèi)臟)共附生放線

2、菌的分離，共分離到50株放線菌。并對(duì)分離到的菌株進(jìn)行了分子鑒定，通過16S rDNA的序列分析，結(jié)果表明所有菌株均屬于鏈霉菌屬。 以枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)、大腸桿菌(Escherichia coli)、金黃色葡萄球菌(Staphlococcus aureus)、短小芽孢桿菌(Bacillus pumilus)、白色假絲酵母(Candida albicans)和黑曲霉(Aspergillus miger

3、)為指示菌，采用牛津杯法對(duì)這些菌株進(jìn)行抗菌活性檢測(cè)，共篩選得到活性菌株15株，占總菌株數(shù)的30％，其中主要是抗革蘭氏陽性細(xì)菌的活性，但活性都較弱；采用MTT法對(duì)其體外抗腫瘤活性進(jìn)行檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)有39株放線菌對(duì)HeLa(人子宮癌細(xì)胞)具有抑制作用，占總菌株數(shù)的78％，其中有15株放線菌對(duì)HeLa(人子宮癌細(xì)胞)有很強(qiáng)的抑制作用，占總菌株數(shù)的30％。 本論文對(duì)兩株具有較強(qiáng)抗腫瘤活性的鏈霉菌菌株A2-7和AO-1的次級(jí)代謝產(chǎn)物進(jìn)行了初步

4、研究。從菌株A2-7的液體發(fā)酵產(chǎn)物中分離并鑒定了9個(gè)化合物，其中4個(gè)為新化合物，Q7、Q19和Q27為雜合萜類，Q10為呋喃酸類。5個(gè)為已知化合物，Q1B和Q26為呋喃酮類物質(zhì)，Q11為苯乙酸苯酯類物質(zhì)，Q16為飽和脂肪酸類物質(zhì)，Q17為吲哚類物質(zhì)；另外，從菌株A2-7的固體發(fā)酵產(chǎn)物中分離到并鑒定了1個(gè)已知化合物Q31，為苯乙酰氨類物質(zhì)。從菌株AO-1的固體發(fā)酵產(chǎn)物中分離并鑒定了4個(gè)已知化合物，其中Q42為氨基酸類物質(zhì)，Q43和Q44為

5、蒽醌類物質(zhì)-Q47為羥基苯乙酮類物質(zhì)。 對(duì)新化合物Q7、Q10、Q19和Q27的抗菌活性及抗腫瘤活性進(jìn)行了研究，在樣品濃度為100μg/ml時(shí)，用MIC法測(cè)定抗菌活性，對(duì)枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)、大腸桿菌(Escherichia coli)、金黃色葡萄球菌(Staphlococcus aureus)、短小芽孢桿菌(Bacillus pumilus)、白色假絲酵母(Candida albicans)和黑曲