尿核苷檢測(cè)在原發(fā)性膽囊癌診斷中的臨床意義.pdf

1、目的：探討基于反相高效液相色譜法檢測(cè)的尿核苷在原發(fā)性膽囊癌診斷中的臨床意義。
　　方法：首先建立高效率的流動(dòng)相梯度淋洗程序，使10種核苷標(biāo)準(zhǔn)品和內(nèi)標(biāo)有很好的分離度；對(duì)反相高效液相色譜法進(jìn)行包括線性相關(guān)性、回收率、準(zhǔn)確度和精確度等方法學(xué)考察，并以此得到10種核苷標(biāo)準(zhǔn)品的標(biāo)準(zhǔn)曲線，驗(yàn)證反相高效液相色譜法檢測(cè)尿核苷的可靠性和可行性；分別對(duì)采集的28例原發(fā)性膽囊癌患者，62例膽囊炎和膽囊息肉患者和70例正常人的尿液樣本進(jìn)行預(yù)處理后，用苯基

2、硼酸凝膠色譜法提取尿中核苷，最后進(jìn)行檢測(cè)，獲得3組尿液標(biāo)本的典型色譜圖；利用標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算3組尿液樣本中的10種核苷水平，并對(duì)其差異進(jìn)行比較明確是否有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；以樣本中核苷含量作為參量，利用主成分分析法區(qū)分原發(fā)性膽囊癌組和良性膽囊疾病組及正常對(duì)照組，并對(duì)其敏感性及特異性與傳統(tǒng)腫瘤標(biāo)記物糖鏈抗原19-9、糖鏈抗原125和癌胚抗原相比較，探討高效液相色譜法診斷原發(fā)性膽囊癌的優(yōu)越性，尿核苷與原發(fā)性膽囊癌的臨床關(guān)系。
　　結(jié)果：通過不斷對(duì)

3、實(shí)驗(yàn)條件的優(yōu)化，建立流動(dòng)相梯度淋洗程序只需要30min，且分離效率和分離度均較高；方法學(xué)驗(yàn)證結(jié)果顯示10種核苷的線性相關(guān)性良好（r>0.99），回收率介于87.39％～121.48%范圍，準(zhǔn)確率介于87.67%～121.33%范圍，精確度RSD介于1.5%～10.5%范圍；原發(fā)性膽囊癌組10種核苷中除了C和A外，其余的8種核苷水平顯著高于良性膽囊疾病組和正常對(duì)照組（P<0.01）；通過主成分分析法，89.3%（25/28）的原發(fā)性膽囊癌