陡脈沖電場誘導(dǎo)腫瘤細胞凋亡及機理的研究.pdf

1、惡性腫瘤是一類嚴重威脅人類健康和生命的疾病,其基本特征就是癌細胞失控的增殖、侵襲和轉(zhuǎn)移。盡管目前已有多種癌癥的治療方法但是都不理想,國內(nèi)外的專家對此進行了深入的研究和探討,提出了一種腫瘤治療的新方法,可以降低放、化療給病人帶來的痛苦,即利用高強度的脈沖電場刺激促使腫瘤細胞發(fā)生凋亡從而達到治療腫瘤的效果,這對腫瘤的治療有理論和實際的意義。本文的主要研究內(nèi)容和結(jié)果如下:1.利用Annexin V-FITC凋亡試劑盒和流式細胞技術(shù)測定正常細胞

2、HL-7702和腫瘤細胞SMMC-7721在不同的參數(shù)的脈沖電場作用下的凋亡情況。結(jié)果顯示,脈寬1.8μs,強度超過200V/cm以上的脈沖電場可以誘發(fā)腫瘤細胞凋亡,正常細胞和腫瘤細胞隨電場強度的增加凋亡程度增大,同參數(shù)下腫瘤細胞的凋亡大于正常細胞。2.利用DNA Ladder試劑盒測定腫瘤細胞在不同參數(shù)電場作用下,DNA的變化情況。結(jié)果顯示,隨電場強度的增加腫瘤細胞DNA斷裂為更小的片段。3.利用Fluo-3染色,激光共聚焦顯微鏡實時

3、測定脈沖電場作用下細胞內(nèi)鈣振蕩變化。結(jié)果顯示,脈寬1.8μs的電場作用下,腫瘤細胞胞內(nèi)鈣離子濃度隨電場強度的增加降低幅度增大;同樣參數(shù)的電場作用,有胞外鈣條件下胞內(nèi)鈣離子濃度的下降程度低于無胞外鈣條件下胞內(nèi)鈣離子濃度的下降程度。4.利用羅丹明123染色,激光共聚焦顯微鏡實時測定脈沖電場作用下細胞線粒體膜電位變化。結(jié)果顯示,脈寬1.8μs的電場作用下,腫瘤細胞線粒體膜電位隨電場強度增大降低幅度增大。5.納秒級脈沖電場作用下,腫瘤細胞凋亡、

4、鈣振蕩和線粒體膜電位的變化情況。結(jié)果顯示,度600V/cm、脈寬120ns的電場作用下,腫瘤細胞無明顯凋亡;細胞外有鈣條件下,胞內(nèi)鈣離子濃度略有下降。同脈寬1.8μs的電場相比強,細胞外無鈣條件下,該電場可使腫瘤細胞胞內(nèi)鈣離子濃度降低幅度更大;線粒體膜電位的降低幅度更大。參考國內(nèi)、外的相關(guān)研究成果,根據(jù)已有的理論和知識對實驗得出的結(jié)果進行分析和討論得出:脈沖電場可以誘導(dǎo)腫瘤細胞凋亡;脈沖電場作用下腫瘤細胞的凋亡可能是由胞內(nèi)鈣離子濃度降低