氨茶堿對(duì)哮喘大鼠Th1-Th2失衡調(diào)節(jié)及一氧化氮、內(nèi)皮素含量影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：支氣管哮喘(簡(jiǎn)稱哮喘)，是由多種細(xì)胞(如嗜酸性粒細(xì)胞、肥大細(xì)胞、T淋巴細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、氣道上皮細(xì)胞等)和細(xì)胞成分參與的氣道慢性炎癥疾病?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)證實(shí)氣道慢性炎癥是引起哮喘的基本病理改變和最主要發(fā)病機(jī)制，如炎癥得不到良好控制，可導(dǎo)致不可逆的氣道重建。糖皮質(zhì)激素(簡(jiǎn)稱激素)是目前治療哮喘氣道炎癥最有效的藥物，因其長(zhǎng)期應(yīng)用存在一定副作用，加上部分患者的“恐激素”心理，使其應(yīng)用受到一定限制，因此如何能使其發(fā)揮最大療效而副作用又最小的問(wèn)題

2、仍有待臨床探討。本課題通過(guò)實(shí)驗(yàn)研究觀察不同劑量氨茶堿及與激素聯(lián)合應(yīng)用對(duì)哮喘大鼠氣道炎癥的治療及抗炎作用，以評(píng)價(jià)聯(lián)合療法的抗炎效果；并通過(guò)觀察哮喘大鼠體內(nèi)γ-干擾素(IFN-γ)、白介素-4(IL-4)、一氧化氮(NO)、內(nèi)皮素(ET-1)含量及IFN-γ/IL-4比值的變化，進(jìn)一步探討氨茶堿的抗炎機(jī)制。 方法：將48只雌雄各半Wister大鼠隨機(jī)分為6組：正常對(duì)照組、哮喘模型組、氨茶堿小劑量組、氨茶堿大劑量組、地塞米松組、氨茶堿

3、地塞米松聯(lián)合組，每組8只。除正常對(duì)照組外，其余5組于第1天、第7天分2次腹腔注射抗原液lm1(含卵蛋白100mg、氫氧化鋁干粉100mg)致敏，正常對(duì)照組用等量的生理鹽水進(jìn)行致敏；第14天開(kāi)始將大鼠放入自制的不完全封閉的有機(jī)玻璃箱內(nèi)，予1％卵蛋白(OVA)溶液用壓縮霧化器噴霧激發(fā)，每天1次，每次20分鐘，連續(xù)激發(fā)10天，第17天起每次激發(fā)半小時(shí)前給予藥物干預(yù)，氨茶堿小劑量組給予氨茶堿5mg/kg,氨茶堿大劑量組給予氨茶堿60mg/kg，

4、地塞米松組給予地塞米松0.75mg/kg，氨茶堿、地塞米松聯(lián)合組給予地塞米松0.375mg/kg和氨茶堿5mg/kg，將所有藥物溶于2ml生理鹽水灌胃，正常對(duì)照組和哮喘模型組給予等量生理鹽水(2ml)灌胃，均每天1次共7天；末次激發(fā)結(jié)束后12小時(shí)內(nèi)，各組大鼠均以12％的烏拉坦腹腔注射麻醉后剪尾取血及斷頭取血備用。取血后分離大鼠氣管，結(jié)扎右肺，左肺用2ml生理鹽水(37℃)經(jīng)氣管插管注入肺內(nèi)，作來(lái)回抽洗兩次(不停留)，收取支氣管肺泡灌洗液

5、(BALF)。采用常規(guī)計(jì)數(shù)法檢測(cè)外周血嗜酸性粒細(xì)胞(EOS)計(jì)數(shù)；ELISA法測(cè)定血清中IFN-γ、IL-4，硝酸還原酶法測(cè)定血清中NO，放射免疫分析法測(cè)定血清中ET-1等指標(biāo)的變化情況。結(jié)果： 1氨茶堿對(duì)哮喘大鼠炎癥細(xì)胞的影響模型組外周血EOS數(shù)、BALF中白細(xì)胞總數(shù)與正常組相比均升高，差異均有顯著性(P<0.001)。氨茶堿大劑量組、地塞米松組和聯(lián)合用藥組均能減少哮喘大鼠外周血EOS數(shù)，氨茶堿大劑量組、地塞米松組和聯(lián)合用藥組

6、與模型組相比差異均有顯著性(P<0.01)，氨茶堿小劑量組與模型組相比差異無(wú)顯著性(P>0.05)；聯(lián)合用藥組和氨茶堿大劑量組、激素組相比無(wú)顯著性差異(P>0.05)；氨茶堿大劑量組與地塞米松組兩組相比差異有顯著性(P<0.01)；氨茶堿大劑量組與氨茶堿小劑量組比較差異有顯著性(P<0.05)。 模型組BALF中白細(xì)胞總數(shù)與正常組相比明顯增加，差異有顯著性(P<0.001)。各組與模型組相比均能明顯降低BALF中白細(xì)胞總數(shù)，氨茶

7、堿大劑量組、地塞米松組和聯(lián)合用藥組與模型組相比均有顯著差異(P<0.001)，氨茶堿小劑量組亦有顯著差異(P<0.05)；聯(lián)合用藥組與激素組相比差異有顯著性(P<0.05)，與氨茶堿大劑量組相比差異無(wú)顯著性(P>0.05)；氨茶堿大劑量組與氨茶堿小劑量組比較有顯著性差異(P<0.01)。 2氨茶堿對(duì)哮喘大鼠血清及BALF中IFN-γ濃度的影響模型組血清及BALF中IFN-γ的濃度與正常組相比明顯降低，差異有顯著性(P<0.001

8、)；經(jīng)藥物治療后，各組大鼠血清及BALF中IFN-γ的濃度與模型組相比均升高，差異有顯著性(P<0.01)；氨茶堿大劑量組血清及BALF中IFN-γ的濃度較小劑量組呈顯著性增高(P<0.05)；氨茶堿大劑量組、地塞米松組和聯(lián)合用藥組血清及BALF中IFN-γ的濃度差異無(wú)顯著性(P>0.05)。 3氨茶堿對(duì)哮喘大鼠血清及BALF中IL-4濃度的影響模型組血清及BALF中IL-4的濃度與正常組相比明顯升高，差異有顯著性(P<0.01

9、)；經(jīng)藥物治療后，各組大鼠血清及BALF中IL-4的濃度與模型組相比均降低，差異均有顯著性(P<0.01)；氨茶堿大劑量組血清及BALF中IL-4的濃度較小劑量組呈顯著性降低(P<0.05)；氨茶堿大劑量組、地塞米松組和聯(lián)合用藥組血清及BALF中IL-4的濃度差異無(wú)顯著性(P>0.05)。 4氨茶堿對(duì)哮喘大鼠血清及BALF中IFN-γ/IL-4比值的影響模型組血清及BALF中IFN-γ/IL-4比值與正常組相比明顯降低，差異有顯

10、著性(P<0.01)；經(jīng)藥物治療后，氨茶堿大劑量組、地塞米松組和聯(lián)合用藥組血清及BALF中IFN-γ/IL-4比值與模型組相比均升高，差異亦均有顯著性(P<0.01)；氨茶堿大劑量組血清及BALF中IFN-γ/IL-4比值較小劑量組呈顯著性升高(P<0.05)；氨茶堿大劑量組、地塞米松組和聯(lián)合用藥組血清及BALF中IFN-γ/IL-4比值比較差異無(wú)顯著性(P>0.05)。 5氨茶堿對(duì)哮喘大鼠血清中NO含量的影響模型組血清中NO含

11、量與正常組相比明顯增高，差異有非常顯著性(P<0.001)；經(jīng)藥物治療后，各組NO含量與模型組相比明顯降低，氨茶堿大劑量組、地塞米松組和聯(lián)合用藥組與模型組相比均有顯著性差異(P<0.01)，氨茶堿小劑量組與模型組比也有顯著性差異(P<0.05)；氨茶堿大劑量組血清中NO含量較小劑量組呈顯著性降低(P<0.01)：地塞米松組與氨茶堿大劑量組比有顯著性差異(P<0.05)；聯(lián)合用藥組與氨茶堿大劑量組比差異有顯著性(P<0.01)。聯(lián)合用藥組

12、和地塞米松組差異無(wú)顯著性(P>0.05)； 6氨茶堿對(duì)哮喘大鼠血清中ET-1含量的影響模型組血清中ET-1含量與正常組相比明顯增高，差異有顯著性(P<0.001)；經(jīng)藥物治療后氨茶堿、地塞米松和聯(lián)合用藥與模型組比均能明顯降低血清中ET-1含量，差異均有顯著性(P<0.01)；氨茶堿大劑量組與小劑量組比差異有顯著性(P<0.01)；氨茶堿大劑量組、地塞米松組和聯(lián)合用藥組之間差異無(wú)顯著性(P>0.05)。 結(jié)論：氨茶堿能有效