轉(zhuǎn)錄因子7類似物2基因多態(tài)性與糖尿病腎病相關(guān)性研究.pdf

1、研究背景： 糖尿病腎病(diabetic nephropathy，DN)是糖尿病(diabetes mellitus，DM)的慢性微血管并發(fā)癥，同時(shí)是糖尿病主要致死原因之一。DN的發(fā)病機(jī)制至今尚未完全闡明，除了環(huán)境因素外，遺傳因素已經(jīng)被證實(shí)是DN發(fā)病的重要一環(huán)。根據(jù)流行病學(xué)及家系調(diào)查顯示，DN的發(fā)生發(fā)展具有遺傳易感性。轉(zhuǎn)錄因子7類似物2(transcription factor7-like2，TCF7L2)基因是Wnt信號(hào)通路的

2、組成成分，參與細(xì)胞的增殖和分化，已經(jīng)有大量的研究證實(shí)TCF7L2基因多態(tài)性與DM相關(guān)；進(jìn)一步的研究指出，在糖尿病及非糖尿病患者中，TCF7L2基因多態(tài)性與慢性腎功能損害相關(guān)，其單核苷酸多態(tài)性(single nucleotide polymorphism，SNP)位點(diǎn)rs7903146的風(fēng)險(xiǎn)等位基因T的攜帶者腎小球?yàn)V過(guò)率(glomerular filtration rate，GFR)比非攜帶者更低，且cystatin C含量更高，故推測(cè)T

3、CF7L2基因多態(tài)性可能與DN存在著相關(guān)性。由于種族差異、環(huán)境暴露因素、病例選擇及研究方法的不同會(huì)造成不同的結(jié)果，且目前還沒(méi)有針對(duì)TCF7L2基因多態(tài)性與中國(guó)漢族人群DN相關(guān)性的研究，因此還應(yīng)在這一領(lǐng)域進(jìn)行更多、更深入的研究。 研究目的： 1.探討中國(guó)南方漢族人群中TCF7L2基因多態(tài)性SNP rs7903146和rs290487的分布情況。 2.探討TCF7L2基因多態(tài)性與糖尿病腎病的相關(guān)性。 研究方法

4、 應(yīng)用聚合酶鏈反應(yīng)—單鏈構(gòu)象多態(tài)性(Polymerase Chain Reaction—Single Strand Conformation Polymorphism，PCR—SSCP)結(jié)合直接測(cè)序的方法，檢測(cè)420例中國(guó)南方漢族無(wú)親緣關(guān)系的個(gè)體TCF7L2 SNPs rs7903146、rs290487的分布情況。研究對(duì)象共分為三組：正常對(duì)照組(N組)169例，糖尿病非腎病組(NDN組)115例，糖尿病腎病組(DN組)136例

5、，對(duì)各組等位基因頻率、基因型頻率進(jìn)行比較分析。應(yīng)用SAS8.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果： 1.正常對(duì)照組、NDN組和DN組均存在TCF7L2基因SNP rs7903146和rs290487多態(tài)性位點(diǎn)。rs7903146基因型在NDN組和DN組中的分布均符合Hardy—Weinberg平衡(NDN組x2=0.24，P=0.63；DN組x2=1.26，P=0.26)；而在正常對(duì)照組的分布卻偏離Hardy—Weinbe

6、rg平衡(x2=13.2，P<0.01)，可能與rs7903146次要等位基因頻率(minor allele frequency，MAF)在中國(guó)漢族人群中太低(T％=3.8％)有關(guān)。rs290487基因型在正常對(duì)照組、NDN組、DN組中的分布均符合Hardy—Weinberg平衡(正常組x2=0.gg，P=0.32；NDN組x2=0.64，P=0.42；DN組x2=0.19，P=0.66)，提示樣本具有群體代表性。 2.SNP

7、rs7903146的基因型C/C、C/T、T/T在正常對(duì)照組的分布頻率分別為93.5％、5.3％、1.2％；NDN組的分布頻率分別為91.3％、8.7％、0；DN組的分布頻率分別為90.4％、8.8％、0.7％。C/C基因型和(C/T+T/T)基因型在各組中的總體分布差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(x2=1.02，P=0.601)。次要等位基因T在正常對(duì)照組、NDN組和DN組的分布頻率分別為3.8％、4.3％和5.1％。等位基因在在各組中的分布也無(wú)統(tǒng)

8、計(jì)學(xué)意義差別(x2=0.61，P=0.737) 3.SNP rs290487基因型T/T、C/T、C/C在正常對(duì)照的分布頻率分別為40.2％、49.1％、10.7％；在NDN組的分布頻率分別為：39.1％、49.6％、11.3％；在DN組的分布頻率分別為28.7％、51.5％、19.9％。各組間基因型的總體分布差別無(wú)統(tǒng)計(jì)意義(x2=8.59，P=0.072)。但是DN組與正常對(duì)照組相比較基因型分布差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(x2=7.27

9、，P=0.026)。DN組中T/T基因型的頻率低于正常對(duì)照組(x2=4.42，P=0.035)；C/C基因型的頻率高于正常對(duì)照組(x2=5.07，P=0.024)。DN組與NDN組以及NDN組與正常對(duì)照組比較，各基因型分布無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的差別(x2分別為4.94和0.051，P分別為0.08和0.945)。次要等位基因C在正常對(duì)照組、NDN組和DN組的分布頻率分別為35.2％，36.1％和45.6％。DN組次要等位基因C的分布頻率(45.

10、6％)顯著高于NDN組(36.1％)和正常對(duì)照組(35.2％)(x2分別為4.64和6.78，P分別為0.03和0.009)。NDN組與正常對(duì)照組相比較，等位基因分布無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的差異(x2=0.049.P=0.83)。 4.SNP rs290487基因型C/C攜帶者的DN患病率為67.5％，顯著高于T/T基因型的46.4％(x2=4.83，P=0.028；OR=2.40，95％CI：1.089-5.272)。C/T基因型攜帶者

11、的DN患病率(55.1％)與T/T基因型(46.4％)相比，差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(x2=1.53，P=0.216；OR=1.42，95％CI：0.81-2.46)；與C/C基因型相比，差別也無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(x2=1.92，P=0.17；OR=0.59，95％CI：0.28-1.25)。等位基因C攜帶者的DN患病率為59.9％，顯著高于等位基因T的50.2％(x=4.64，P=0.031；OR=1.48，95％CI：1.04-2.13)。

12、 結(jié)論： 1.正常對(duì)照組、NDN組和DN組均存在TCF7L2基因SNP rs7903146和rs290487多態(tài)性位點(diǎn)。rs7903146的基因型C/C、C/T、T/T在正常對(duì)照組的分布頻率分別為93.5％、5.3％、1.2％；NDN組的分布頻率分別為91.3％、8.7％、0；DN組的分布頻率分別為90.4％、8.8％、0.7％。次要等位基因T在正常對(duì)照組、NDN組和DN組的分布頻率分別為3.8％、4.3％和5.1％。rs29

13、0487基因型T/T、C/T、C/C在正常對(duì)照的分布頻率分別為40.2％、49.1％、10.7％；在NDN組的分布頻率分別為：39.1％、49.6％、11.3％；在DN組的分布頻率分別為28.7％、51.5％、19.9％。次要等位基因C在正常對(duì)照組、NDN組和DN組的分布頻率分別為35.2％，36.1％和45.6％。 2.TCF7L2基因多態(tài)性與DN發(fā)病相關(guān)。攜帶rs290487等位基因C的DM人群DN患病風(fēng)險(xiǎn)高于非攜帶者，且C