水通道蛋白8在妊娠肝內(nèi)膽汁淤積癥孕鼠肝細胞表達的研究.pdf

1、目的：妊娠肝內(nèi)膽汁淤積癥(intrahepatic chlestasis of pregnancy，ICP)是妊娠期特有的并發(fā)癥，目前其發(fā)病機制仍未完全明了。研究已表明水通道蛋白8(aquaporin-8，AQP8)在大鼠肝細胞膽汁分泌過程中水的轉(zhuǎn)運起著重要的作用。本研究通過檢測妊娠肝內(nèi)膽汁淤積癥孕鼠肝細胞AQP8及其mRNA的表達變化，探討AQP8在ICP發(fā)病機制中的意義。 方法：隨機將20只15d的孕鼠分成ICP組和對照組，

2、分別給ICP組皮下注射17-α-乙炔雌二醇(ethinylestradiol，EE)2.5mg.kg-1.d-1，連續(xù)5d，建立ICP孕鼠模型；正常對照組皮下注射1，2-丙二醇(propylene glycol，PG)2.5mL.kg-1.d-1，連續(xù)5d。分別測定兩組用藥前和用藥后第5d血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、總膽汁酸(TBA)的水平，用化學(xué)比色法檢測兩組肝細胞Na+-K+三磷酸腺苷(ATP)酶的活性。采用免

3、疫組化法檢測兩組肝細胞AQP8蛋白的相對表達量和定位分布；逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)技術(shù)檢測兩組肝細胞AQP8mRNA的表達水平。 結(jié)果：ICP組注射EE后血清ALT、AST、TBA較用藥前顯著升高(P＜0.05)，對照組血清ALT、AST、TBA無明顯變化(P＞0.05)； ICP組孕鼠肝細胞Na+-K+ATP酶的活性為0.61±0.12，對照組為0.85±0.07，差異有顯著性(P＜0.05)。ICP孕鼠模型成功建立

4、。ICP組和對照組肝細胞均有AQP8蛋白和mRNA的表達。AQP8主要在肝細胞的細胞漿表達，ICP組肝細胞AQP8蛋白的相對表達量為10.80±2.40，對照組為17.14±2.24，差異有顯著性(P＜0.05)；ICP組肝細胞AQP8 mRNA的相對表達量為1.07±0.11，對照組為0.80±0.11，差異有顯著性(P＜0.05)。 結(jié)論：(1)孕鼠肝細胞有AQP8蛋白和mRNA表達，其蛋白表達主要定位于肝細胞的細胞漿。AQ