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文檔簡介
1、第一部分全基因組表達譜芯片檢測
目的:利用基因芯片技術找出原發(fā)性膽汁性肝硬化(primary biliary cirrhosis,PBC)患者中差異表達的基因。方法:收集PBC患者和健康對照各3例,采集外周靜脈血,提取PBMC總RNA,進行人類全基因組表達譜芯片(22K,約22000個基因)檢測。結果:基因芯片共篩選出356個在PBC中差異表達的基因,其中296個表達上調,60個表達下調。結論:基因芯片為探索PBC的發(fā)病機
2、制提供了方向。
第二部分實時熒光定量PCR及ELISA檢測
目的:擴大樣本量驗證芯片結果的準確性,進一步分析篩選基因mRNA及蛋白水平與疾病相關性。方法:選取5個基因CCL20、CCL3、PBEF1、S100A12、CD14,擴大樣本量對PBC患者、健康對照、慢性乙肝患者進行RT-PCR及ELISA驗證。結果:PBC患者PBMC中CCL20、CCL3、PBEF1、S100A12、CD14 mRNA表達均升高,
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