MACS分選人前列腺癌類干細(xì)胞的初步鑒定.pdf_第1頁
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1、目的:通過免疫磁珠細(xì)胞分選(Magnetic bead cell sorting，MACS)方法從人前列腺癌細(xì)胞系PC-3中分選CD133+/CD44+干細(xì)胞并初步鑒定。
　　方法:運(yùn)用流式細(xì)胞儀分別檢測(cè)MACS分選前后PC-3細(xì)胞膜上CD133和CD44表達(dá)情況;觀察無血清培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞成球情況，免疫熒光檢測(cè)CD133/CD44表達(dá)情況;比較細(xì)胞在分選前后的形態(tài)學(xué)、增殖能力方面的差異;免疫組化和western blot檢測(cè)誘導(dǎo)分

2、化前后前列腺酸性磷酸酶（Prostatic acid phosphatase，PAP）蛋白情況。
　　結(jié)果:流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)PC-3細(xì)胞CD133和CD44的陽性表達(dá)分別是（1.33±0.05）％和（0.87±0.06）％，而MACS分選后分別為(84.82±0.07)％和（99.91±0.03）％;免疫熒光檢測(cè)CD133+/CD44+細(xì)胞培養(yǎng)后繼續(xù)呈陽性表達(dá);CD133+/CD44+細(xì)胞增殖能力高于PC-3細(xì)胞(t=11.0，P=

3、0.008)以及高于誘導(dǎo)后的CD133+/CD44+細(xì)胞(t=40.1，P=0.001); CD133+/CD44+細(xì)胞經(jīng)過轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子（Transforming growth factor-beta，TGF-β）誘導(dǎo)后免疫組化和western blot檢測(cè)PAP表達(dá)呈陽性，而未誘導(dǎo)的CD133+/CD44+細(xì)胞表達(dá)呈陰性。
　　結(jié)論:MACS從PC-3細(xì)胞株中分選的CD133+/CD44+干細(xì)胞經(jīng)過初步功能性鑒定具有干細(xì)胞的某些

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