吳茱萸提取物軟膏的制備及局部藥動學(xué)研究.pdf

1、目的:
　　吳茱萸提取物是一種有效的多靶點鎮(zhèn)痛藥，其主要活性成分為吳茱萸堿(EVO)和吳茱萸次堿(RUT)，然而，其口服給藥易引起頭痛、劇烈腹痛、視物不清等多種不良反應(yīng)。局部外用制劑能減少系統(tǒng)毒副作用。本課題前期已將吳茱萸提取物制備成外用軟膏，發(fā)現(xiàn)皮膚角質(zhì)層為其經(jīng)皮滲透的主要屏障。本課題在前期工作的基礎(chǔ)上，以皮膚累積滲透性為指標，通過添加促滲劑，提高提取物的經(jīng)皮滲透，并采用微透析取樣技術(shù)對制劑的經(jīng)皮給藥藥動學(xué)進行研究和比較，最終確

2、定吳茱萸提取物軟膏的處方。本文結(jié)果將為提取物外用制劑的研究和開發(fā)提供理論基礎(chǔ)和實驗依據(jù)。
　　方法:
　　(1)建立皮膚接收液中EVO和RUT含量測定的HPLC法;以離體乳豬皮為滲透屏障，采用改良直立式Franz擴散池，考察萜烯類促滲劑種類和濃度對EVO和RUT體外經(jīng)皮滲透性的影響。
　　(2)以增量法和減量法考察灌流液流速及EVO、RUT濃度對探針體外回收率的影響，采用減量法對EVO、RUT微透析探針的體內(nèi)回收率進行

3、校正。
　　(3)以18只雄性SD大鼠為實驗對象，隨機分成3組，大鼠腹部去毛并于皮下植入微透析探針，分別給予0.5g無促滲劑、3％茴香腦、5％茴香腦的吳茱萸提取物軟膏，采用微透析技術(shù)監(jiān)測給藥10h內(nèi)大鼠皮下EVO、RUT濃度-時間變化過程。
　　(4)建立吳茱萸提取物軟膏的質(zhì)量控制體系，考察其外觀性狀、pH值、含量、錐入度及初步穩(wěn)定性。
　　結(jié)果:
　　(1)體外經(jīng)皮滲透結(jié)果表明，5％的萜烯類促滲劑對EVO體外經(jīng)

4、皮促滲順序為:茴香腦＞檸檬烯＞1，4-桉葉素＞薄荷腦＞四氫香葉醇≈香葉醇＞橙花叔醇＞法尼醇＞冰片＞陰性對照＞甘草酸二鉀;而對RUT促滲順序為:茴香腦＞1，4-桉葉素＞檸檬烯＞薄荷腦＞香葉醇＞四氫香葉醇＞橙花叔醇＞法尼醇＞冰片＞陰性對照＞甘草酸二鉀。
　　其中，茴香腦、1，4-桉葉素、檸檬烯的促滲效果最好，EVO的Q24分別為1.78±0.13、1.49±0.10、1.60±0.12μg·cm-2，增滲比ER分別為3.40、2.91

5、、3.20;RUT的Q24分別為1.74±0.14、1.64±0.13、1.57±0.11μg·cm-2，增滲比ER分別為4.39、3.73、3.52。
　　選擇這3類促滲效果最好的促滲劑，考察其濃度對吳茱萸提取物軟膏體外經(jīng)皮滲透的影響。結(jié)果在1-5％濃度范圍內(nèi)，促滲作用隨濃度的增大而增強;但當濃度由5％增至8％時，Q24和ER并未增加。在篩選范圍內(nèi)，促滲劑為5％茴香腦時，吳茱萸提取物軟膏體外經(jīng)皮滲透性能最好，其中EVO的Q24為

6、1.81±0.11μg·cm-2，增滲比ER為3.21;而RUT的Q24為1.76±0.13μg·cm-2，增滲比ER為3.84。
　　(2)體內(nèi)外回收率結(jié)果表明，灌流液流速與探針體外回收率成反比，EVO、RUT濃度對體內(nèi)外回收率幾乎無影響。增量法和減量法測得探針體外回收率基本一致，EVO回收率分別為46.09±3.74％和45.20±3.37％，RUT回收率分別為56.23±4.63％和54.88±3.92％;探針體內(nèi)回收率EV

7、O為29.33±3.15％，RUT為36.36±3.21％。
　　(3)局部藥動學(xué)結(jié)果表明，無促滲劑組、3％茴香腦組、5％茴香腦組的吳茱萸提取物軟膏的皮下Cmax、AUC0-10、AUC0-∞依次增大，表明在1-5％濃度范圍內(nèi)，促滲效果與促滲劑的濃度成正比。提示以5％的茴香腦作為促滲劑能有效促進提取物的經(jīng)皮滲透，有利于臨床疼痛的治療。
　　(4)經(jīng)處方優(yōu)化后的吳茱萸提取物軟膏呈淡黃色半固態(tài)、均勻細膩，pH為6.71±0.11

8、，粘度為70.1±6.2Pa·S，錐入度為123.9±13.9，含量在99％-101％之間;4000rpm下離心30min后未出現(xiàn)分層;制劑40℃恒溫避光保存30天穩(wěn)定。
　　結(jié)論:
　　(1)采用改良Franz直立式透皮擴散池和微透析取樣技術(shù)篩選出來的5％茴香腦能有效改善吳茱萸提取物的體外及體內(nèi)經(jīng)皮滲透性。
　　(2)提取物軟膏性質(zhì)穩(wěn)定，質(zhì)量可控，為吳茱萸提取物外用制劑的開發(fā)提供參考，并為臨床的鎮(zhèn)痛治療提供了一個新思