脈沖電磁場防治骨質(zhì)疏松癥的體內(nèi)外實驗研究.pdf

1、為了證實PEMFs在防治骨質(zhì)疏松癥中的作用,我們用該校生物醫(yī)學工程系研制的頻率分別為1Hz和15Hz,脈沖延時為5ms,磁感應強度為0-8×10<'-4>T的PEMFs骨質(zhì)疏松治療儀進行了一系列體內(nèi)、外實驗研究,以探討PEMFs對絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥的預防作用以及其作用機制,尋找最佳的治療"窗口".該研究主要包括兩大部分內(nèi)容.1.體內(nèi)動物實驗:用Sprague-Dawly雌性大鼠去勢建立絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥動物模型,去勢后開始用頻率為15Hz、

2、磁感應強度分別為2×10<'-4>T、4×10<'-4>T、8×10<'-4>T的PEMFs進行6h/d,共12周的治療.觀察不同磁感應強度的PEMFs對去勢大鼠骨鈣素、骨密度、骨生物力學參數(shù)及骨形態(tài)計量學參數(shù)的影響,以探討PEMFs對去勢大鼠骨質(zhì)疏松癥的預防作用;用雌性大鼠去勢建立絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥動物模型,去勢后分別在白天(9:00-15:00)和夜間(0:00-6:00)開始用頻率為15Hz、磁感應強度4×10<'-4>T的PEMF

3、s進行6h/d,共12周的治療,觀察晝夜節(jié)律對PEMFs預防去勢大鼠骨質(zhì)疏松癥的作用的影響;用免疫組織化學方法觀察PEMFs作用后松質(zhì)骨中IL-1 β和TNF-α蛋白表達的變化,探討IL-1 β和TNF-α在PEMFs預防骨質(zhì)疏松癥機制中的作用.2.體外成骨細胞培養(yǎng)實驗.用SD仔鼠顱骨建立原代大鼠成骨細胞培養(yǎng)模型,并進行鑒定;用頻率為15Hz、磁感應強度4×10<'-4>T的PEMFs作用于培養(yǎng)的大鼠成骨細胞,采用透射電鏡、流式細胞儀、

4、MTT實驗、ALP活性測定以及四環(huán)素熒光標記等方法,觀察PEMFs對大鼠成骨細胞的超微結(jié)構(gòu)、細胞周期、增殖、分化以及體外骨形成的影響,觀察PEMFs對大鼠成骨細胞的作用;用免疫組織化學染色的方法觀察PEMFs作用于培養(yǎng)的大鼠成骨細胞后,成骨細胞中Cbfa1、BMP-2表達的變化,探討Cbfa1、BMP-2在PEMFs治療骨質(zhì)疏松癥中的作用機制;用流式細胞儀、TUNEL法、免疫組織化學等方法觀察PEMFs作用于大鼠成骨細胞后成骨細胞凋亡率