高鹽高脂對血管內(nèi)膜影響的初步研究.pdf

1、研究目的：
　　 1．試圖構(gòu)建一種新的動脈粥樣硬化大鼠模型。
　　 2．探討這種動脈粥樣硬化大鼠模型的血管內(nèi)膜相關(guān)改變。
　　 3．RAAS拮抗藥物及辛伐他汀干預對高鹽高脂引起的血管內(nèi)膜改變的影響。
　　 方法：
　　 1.動物模型的構(gòu)建
　　 選擇3周齡SPF級雄性Wistar大鼠100只，隨機分為正常飼料（含0.5％NaCl）喂養(yǎng)組（NS，n=24）、高鹽飼料（含4％NaCl）喂養(yǎng)組（

2、HS，n=24）、高鹽高脂飼料（4％NaCl+49％Fat）喂養(yǎng)組（HSF，n=52）。飼養(yǎng)12周時，每組隨機取12只處死，稱體重，測量頸總動脈有創(chuàng)血壓、檢測血鉀、血鈉、血糖、血脂及胰島素濃度；取胸主動脈作形態(tài)學測量動脈內(nèi)膜增厚指數(shù):內(nèi)膜厚度/中膜厚度比值（I/M）及免疫組化檢測Cx37、Cx40、Cx43、Cx45及Cx46蛋白表達并測量陽性區(qū)域累計光密度（IOD）。剩余的實驗動物進行以下實驗。
　　 2.藥物干預
　　

3、 NS（n=12）及HS（n=12）。 HSF再次隨機分為5組：一組繼續(xù)以高鹽高脂飼料喂養(yǎng)（HSF，n=8），其余動物在喂養(yǎng)高鹽高脂飼料同時分別加入替米沙坦（HSF+T，n=8，10mg/kg/d）、安體舒通（HSF+A，n=8，80mg/kg/d）、培哚普利（HSF+P，n=8，2mg/kg/d）及辛伐他?。℉SF+S，n=8，10mg/kg/d）干預。至30周時結(jié)束實驗，進行上述實驗指標檢測。
　　 結(jié)果：
　　

4、1.收縮壓（SBP）變化
　　 1.1高鹽及高鹽高脂導致血壓升高：實驗12周，高鹽高脂組（SBP189.43 14.65mmHg）與高鹽組（SBP173.0512.07mmHg）收縮壓明顯高于正常對照組（SBP153.6520.53mmHg），P＜0.01。實驗30周，高鹽高脂組（SBP 190.03 14.48mmHg）及高鹽組（SBP 185.2513.50mmHg）收縮壓明顯高于正常對照組（SBP161.00 19.49m

5、mHg），P＜0.01。結(jié)果提示：3周齡正常Wistar大鼠長期以高鹽或高鹽高脂飼料喂養(yǎng)形成高血壓，其血壓改變與我們前期研究結(jié)果相吻合。
　　 1.2 RAAS拮抗藥有效降低血壓：給予替米沙坦、培哚普利及安體舒通干預18周后血壓明顯下降，HSF+T組（SBP161.9515.62mmHg）、HSF+P組收縮壓（SBP 159.93 17.14mmHg）以及HSF+A組收縮壓（SBP 155.34 13.16mmHg）較高鹽高脂組

6、及高鹽組收縮壓低，P＜0.01；HSF+T、HSF+P及HSF+A組與正常對照組間無差異，P＞0.05。以上結(jié)果表明：RAAS拮抗藥能有效地降低由高鹽和高鹽高脂誘導的高血壓。
　　 1.3辛伐他汀對血壓影響不明顯：給予辛伐他汀干預18周后血壓無明顯下降，HSF+S組（SBP 180.36 9.94mmHg）與高鹽高脂組及高鹽組比較，P＞0.05；高于正常對照組，P＜0.01。
　　 2.血液生化改變
　　 2.1

7、實驗12周，高鹽高脂組出現(xiàn)明顯血脂異常：高鹽高脂組TG、TC及LDL（TG 0.97±0.54mmol/L，TC 1.51±0.24mmol/L，LDL 0.90±0.23mmol/L）與正常對照組（TG 0.31±0.17mmol/L，TC 0.88±0.12mmol/L，LDL 0.53±0.23mmol/L）比較，P＜0.05；兩組HDL比較（0.83±0.17mmol/L vs 0.89±0.13mmol/L）,P＞0.05。高

8、鹽組血脂水平與正常對照組比較無差異，P＞0.05。
　　 2.2 實驗30周：
　　 2.2.1高鹽高脂組TG及LDL仍存在異常:高鹽高脂組（TG 2.96±0.56mmol/L，LDL2.60±0.51mmol/L）與正常對照組（TG 1.10±0.24mmol/L,LDL 0.81±0.10mmol/L）比較，P＜0.05。
　　 2.2.2給予替米沙坦、培哚普利及安體舒通干預后，血脂改變不明顯：HSF+T組

9、（TG 1.74±0.57mmol/L，LDL 1.44±0.56mmol/L）、HSF+P（TG 1.72±0.36mmol/L，LDL 1.48±0.26mmol/L）HSF+A（TG 2.15±0.66mmol/L，LDL 1.85±0.66mmol/L）三組與HSF組比較無差異，P＞0.05；三組TG及LDL水平高于正常對照組，P＜0.05。
　　 2.2.3辛伐他汀干預后TG及LDL降低，HSF+S組（TG 1.51±

10、0.26mmol/L，LDL 1.17±0.26mmol/L）與高鹽高脂組比較，P＜0.05；各組TC及HDL兩兩比較無差異，P＞0.05。2.2.4高鹽組血脂水平與正常對照組組無差異，P＞0.05。
　　 2.3血糖（FBG）、胰島素（INS）及穩(wěn)態(tài)胰島素抵抗指數(shù)（HOMA-IR）改變：實驗12周，高鹽高脂組FBG、HOMA-IR明顯異常，高鹽高脂組（FBG 8.01±1.52mmol/L，HOMA-IR 2.45±0.36）

11、明顯高于正常對照組（FBG 6.86±1.18mmol/L，HOMA-IR1.84±0.41），P＜0.01；INS水平，高鹽高脂組與正常對照組比較無差異，P＞0.05。高鹽組以上三個指標與正常對照組比較無差異，P＞0.05。
　　 2.4血Na+、K+改變：整個實驗階段，各組Na+及K+比較無異常，P＞0.05。
　　 3．形態(tài)學檢測動脈內(nèi)膜改變：HE染色各組均未見動脈粥樣斑塊形成。
　　 3.1高鹽及高鹽高脂

12、導致動脈內(nèi)膜增厚：
　　 3.1.1實驗12周高鹽高脂組I/M（0.317±0.036）及高鹽組I/M（0.270±0.028）明顯高于正常對照組（0.219±0.050），P＜0.05。
　　 3.1.2至實驗30周時，高鹽高脂組I/M（0.323±0.059）及高鹽組I/M（0.267±0.025）仍高于正常對照組（0.218±0.026），P＜0.05。
　　 3.1.3高鹽高脂組高于高鹽組，P＜0.05。

13、
　　 3.2RAAS拮抗藥物改善動脈內(nèi)膜增厚：給予替米沙坦、培哚普利及安體舒通干預后動脈內(nèi)膜增厚得到改善，HSF+T組I/M（0.251±0.040）、HSF+P組I/M（0.240±0.032）及HSF+A組I/M（0.263±0.102）低于HSF組，P＜0.05；三組與正常對照組及高鹽組比較無差異，P＞0.05。
　　 3.3辛伐他汀干預改善動脈內(nèi)膜增厚：給予辛伐他汀干預后，HSF+S組I/M比值（0.219±0

14、.016）低于高鹽高脂組，P＜0.05；與高鹽組（0.267±0.025）及正常對照組（0.218±0.026）對比無差異，P＞0.05。
　　 4．免疫組化檢測動脈內(nèi)膜Cx蛋白表達：免疫組化顯示Cx37在胸主動脈內(nèi)膜表達，Cx40部分表達，Cx43、Cx45及Cx46未見表達。
　　 4.1高鹽及高鹽高脂下調(diào)Cx37表達：比較Cx37陽性區(qū)域IOD值，顯示Cx37表達下調(diào)。
　　 4.1.1實驗12周高鹽高脂組

15、（4299.28±288.13）及高鹽組（4547.95±357.21）明顯低于正常對照組（27610.39±926.72），P＜0.01。
　　 4.1.2實驗30周高鹽高脂組（2843.83±545.80）及高鹽組（2883.47±523.43）仍明顯低于正常對照組（16264.33±1261.97），P＜0.01。
　　 4.2 RAAS拮抗藥干預后Cx37表達增加：給予替米沙坦、培哚普利及安體舒通干預后，動脈內(nèi)膜

16、Cx37蛋白表達量明顯升高。HSF+T（IOD 9925.20±652.69）、HSF+P（IOD 10738.19±1153.06）以及HSF+A（IOD 4004.49±356.34）高于高鹽高脂組及高鹽組，但仍低于正常對照組組。
　　 4.3辛伐他汀干預上調(diào)Cx37表達：給予辛伐他汀干預后，動脈內(nèi)膜Cx37表達升高。HSF+S組（IOD 9856.84±669.04）明顯高于高鹽高脂組及高鹽組，但低于正常對照組。