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文檔簡介
1、隨著化石能源的逐漸枯竭，燃料乙醇作為可替代能源的研究和發(fā)展在世界范圍內(nèi)受到越來越多的重視。構(gòu)建能夠高效發(fā)酵糖類生產(chǎn)乙醇的工程菌株是當(dāng)前燃料乙醇生產(chǎn)研究的一項重要內(nèi)容。
本研究首先對運動發(fā)酵單胞菌乙醇發(fā)酵條件和培養(yǎng)基成分分別進行單因子優(yōu)化和正交優(yōu)化；其后采用該菌基因組為模板，克隆乙醇發(fā)酵關(guān)鍵酶基因pdc，以誘導(dǎo)型表達質(zhì)粒pET-28a為載體，構(gòu)建重組質(zhì)粒,轉(zhuǎn)化大腸桿菌BL21，初步優(yōu)化誘導(dǎo)表達條件，最后，應(yīng)用重組大腸桿菌進行乙醇
2、發(fā)酵試驗，研究該基因的表達對宿主菌體的葡萄糖代謝途徑及乙醇發(fā)酵能力的影響。
經(jīng)過優(yōu)化后確定運動發(fā)酵單胞菌Z-1培養(yǎng)基最佳葡萄糖含量為10％~15%，最適接種量為發(fā)酵培養(yǎng)基體積的1/50，最佳發(fā)酵溫度為30℃~35℃，培養(yǎng)基最適pH為8.0~9.0；其發(fā)酵培養(yǎng)基最佳基礎(chǔ)成分為：MgSO4：0.01%，(NH4)2SO4：0.18%，KH2PO4：0.18%，Yeastextract：0.9%；在這四種成分中，Yeastextra
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