EGFR-STAT3信號(hào)途徑阻斷對(duì)胃癌細(xì)胞淋巴生成相關(guān)因子表達(dá)及細(xì)胞生物學(xué)特點(diǎn)的影響研究.pdf

1、研究目的:
　　 采用單克隆抗體阻斷EGFR的激活，調(diào)節(jié)其下游調(diào)控基因STAT3的表達(dá)，進(jìn)而抑制胃癌細(xì)胞對(duì)于淋巴生成相關(guān)因子(VEGF-C，VEGF-D)的表達(dá)。以證實(shí)單克隆EGFR抗體對(duì)于胃癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移發(fā)生發(fā)展的抑制作用，并分析EGFR/STAT3信號(hào)途徑阻斷對(duì)于何種分化程度的胃癌細(xì)胞生物學(xué)性質(zhì)改變顯著，對(duì)不同分化程度胃癌患者腫瘤的診斷、治療和預(yù)后判斷起指導(dǎo)作用。
　　 研究方法:
　　 1.選取常見的不同分化

2、程度人胃癌細(xì)胞株MKN-28(高分化)、SGC-7901（中分化）、MGC-803(低分化)及人正常胃黏膜上皮細(xì)胞株GES-1（對(duì)照），進(jìn)行細(xì)胞傳代、培養(yǎng);
　　 2.流式細(xì)胞術(shù)及RT-PCR檢測(cè)不同分化程度胃癌細(xì)胞株EGFR表達(dá)水平;
　　 3.對(duì)于EGFR單克隆抗體(Nimotuzumabinjection，商品名:泰新生)處理前后，免疫組化及RT-PCR法分別檢測(cè)STAT3、p-STAT3、VEGF-C、VEGF-

3、D在不同分化胃癌細(xì)胞株[MKN-28(高分化)、SGC-7901（中分化）、MGC-803（低分化）及人正常胃黏膜上皮細(xì)胞株GES-1（對(duì)照）]中的蛋白及mRNA表達(dá)變化;
　　 4.檢測(cè)應(yīng)用EGFR單克隆抗體（泰新生）處理前后不同分化程度胃癌細(xì)胞的細(xì)胞凋亡（流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)）、細(xì)胞增殖(MTT法檢測(cè))、細(xì)胞侵襲(Transwell小室檢測(cè))、細(xì)胞周期（流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)）方面的細(xì)胞生物學(xué)特性;
　　 5.數(shù)據(jù)分析采用SPSS

4、17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行處理，p＜0.05作為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 結(jié)果:
　　 1.流式細(xì)胞術(shù)及RT-PCR檢測(cè)結(jié)果均顯示:人胃癌細(xì)胞株EGFR呈現(xiàn)高表達(dá)，不同胃癌細(xì)胞株EGFR的表達(dá)程度為MGC-803(低分化)＞SGC-7901（中分化）＞MKN-28(高分化)，胃癌細(xì)胞分化程度越低，EGFR表達(dá)越強(qiáng)(p＜0.05)。
　　 2.EGFR的表達(dá)和STAT3、VEGF-C、VEGF-D的表達(dá)變化趨勢(shì)同步，且表

5、達(dá)有相關(guān)性。
　　 3.胃癌細(xì)胞STAT3、p-STAT3、VEGF-C、VEGF-DmRNA及蛋白的表達(dá)，在EGFR單克隆抗體藥物處理組較未行藥物處理組顯著減弱(p＜0.05)。
　　 4.單克隆EGFR抗體藥物處理后，胃癌細(xì)胞增殖減慢、細(xì)胞凋亡加快、細(xì)胞侵襲性減弱、細(xì)胞周期停滯，藥物處理前后有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p＜0.05)。
　　 結(jié)論:
　　 1.人胃癌細(xì)胞株EGFR高表達(dá)，胃癌細(xì)胞分化程度越低，EGF