XRCC1基因單核苷酸多態(tài)，環(huán)境暴露因素與非吸煙女性肺癌關系的研究.pdf

1、肺癌是我國大中城市中惡性腫瘤的第一位死因，其發(fā)病率和死亡率增長迅速。盡管吸煙是肺癌發(fā)生的首要原因，但其不足以解釋非吸煙肺癌患者的流行病學特征。特別是女性肺癌患者多以非吸煙者為主，肺腺癌為主要病理類型。肺癌的形成是一個多因素、多階段的過程，是環(huán)境危險因素和個體遺傳因素復雜交互作用的結(jié)果。DNA修復基因單核苷酸多態(tài)可以改變機體蛋白質(zhì)功能以及個體修復損傷DNA的能力，而DNA修復能力的缺陷會導致個體遺傳的不穩(wěn)定性乃至癌癥的發(fā)生。X射線修復交叉

2、互補基因(X-ray repair cross complementing groupl．XRCC1)是一個重要的DNA損傷修復基因，它在堿基切除修復和單鏈斷裂修復機制中都發(fā)揮了關鍵性的作用。XRCC1基因單核苷酸多態(tài)很可能改變其編碼蛋白的功能和修復能力，從而導致遺傳的不穩(wěn)定性和癌癥的發(fā)生。 目的： 本研究旨在應用聚合酶鏈反應—限制性片段長度多態(tài)性(PCR—RFLP)技術(shù)檢測并分析了非吸煙女性人群中XRCC1 Arg19

3、4Trp，Arg280His，Arg399Gln和XRCC1 T-77C多態(tài)性改變及其單體型與非吸煙女性肺癌易感性關系以及與環(huán)境暴露危險因素的交互作用，為篩檢高危人群，進行肺癌一級預防提供理論依據(jù)。 方法： 本研究采用病例對照研究方法，包括新發(fā)非吸煙女性肺癌350例，取癌旁組織提取基因組DNA。非癌對照350例，按年齡(±5歲)與病例頻數(shù)匹配，采外周血提取基因組DNA，應用聚合酶鏈反應-限制性片段長度多態(tài)性(PCR-RF

4、LP)技術(shù)，檢測并分析了XRCC1四種多態(tài)性(XRCCl Argl94Trp，Arg280His，Arg399Gln和XRCC1 T-77C)基因型改變；同時通過流行病學調(diào)查分析非吸煙女性肺癌可能的環(huán)境暴露危險因素；采用非條件logistic回歸分析多態(tài)基因型與肺癌的相關關系及其與暴露環(huán)境危險因素的交互作用；應用SHEsis軟件推測多態(tài)位點的單體型并分析其與非吸煙女性肺癌易感性的關系。 一、單因素分析 1、環(huán)境危險因素及

5、XRCC1突變等位基因在病例組和對照組中的分布 無論在工作場所或家庭中，成年期或未成年期均未見到被動吸煙與非吸煙女性肺癌發(fā)生有何聯(lián)系。病例組與對照組間煤煙暴露史，腫瘤家族史也無顯著性差異。但病例組患者油煙暴露的比例顯著高于對照組(42.3％vs 22.0％，p<0.05)。油煙暴露引起肺癌的相對危險度OR為2.60(95％CI[1.87-3.61])。此外，在350名正常對照中，XRCC基因各位點的突變等位基因的頻率分別為：XR

6、CC1-77C=0.09；194Trp=0.25；280His=0.11；399Gin=0.25，頻率分布符合Hanay-Weinberg遺傳平衡定律。但XRCC1 T-77C和Arg399Gha等位基因的頻率在病例組和對照組中的分布存在統(tǒng)計學意義上的差異(P=0.004和0.003)。 2、XRCC1基因各位點多態(tài)基因型與非吸煙女性肺癌易感性的關系 XRCC1基因Arg194TrP和Arg280His兩個位點的多態(tài)性與

7、肺癌的患病風險無顯著性關聯(lián)。在調(diào)整了年齡和油煙暴露等因素后，攜帶XRCC1 399Gin/Gin基因型的個體患肺癌的風險是攜帶純合野生基因型個體的1.73倍(95％CI[1.01～2.97]，P=0.01)。攜帶XRCC1-77TC的個體與攜帶-77TT者比較，患肺癌的風險增加了51％(校正OR=1.51，95％CI[1.01～2.97]，P=0.04)，而攜帶-77CC的個體與-77TT者比較，其患肺癌的風險增加約2倍(校正OR=3.

8、14，95％CI[0.96～10.30]，p=0.091)，但未達到統(tǒng)計學顯著性水平。 3、分層分析 將肺癌組按病理組織類型進行分層分析，發(fā)現(xiàn)腺癌組XRCC1密碼子399位點和啟動子區(qū)域-77位點多態(tài)基因型分布與對照組間的差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，而且攜帶XRCC1399Gln和-77C突變等位基因的個體發(fā)生肺腺癌的危險性更大。攜帶雜合突變型A瑪/Gin和純合突變型Gin/Gin基因型的個體患肺腺癌的風險分別是A

9、rg/Arg基因型攜帶者的1.61倍(95％CI為1.09～2.36，)和2.58倍(95％CI為1.42～4.69)。攜帶-77TC/CC聯(lián)合突變基因型的個體患肺腺癌的風險增加到1.81(校正OR=1.81，95CI[1.18～2.79])。在鱗癌組和其他類型組中，XRCC1基因四個多態(tài)位點基因型在病例組與對照組間的分布均無顯著性差異。 二、多因素logistic回歸分析 我們首先剔出了在單因素分析中無統(tǒng)計學顯著性意義

10、的變量因素，最后進入到回歸方程的變量包括XRCC1基因兩個多態(tài)位點(399密碼子和啟動子區(qū)域-77)和兩個非遺傳因素(年齡和烹飪油煙暴露)。烹飪油煙暴露是回歸模型中最重要的危險因素(癌癥組：校正OR=2.51；腺癌組：校正OR=2.75)；在此模型中，遺傳因素對非吸煙女性肺癌的發(fā)生風險具有相對中等的影響。399位點Gln/Gln基因型攜帶者(Gln/Gln vs Arg/Arg：OR=1.75，95％CI[1.02～3.01])和啟動子

11、區(qū)域-77C突變等位基因(TC+CC vs TT：OR=1.66，95％CI[1.13～2.42])攜帶者均可顯著增加患肺癌的風險。按肺癌病理組織類型分層分析顯示，肺腺癌組的OR值比總肺癌組略有增加，而且399位點Arg/Gln基因型攜帶者發(fā)生肺腺癌的風險也顯著增加(校正OR=1.63，95％CI[1.11～2.40。P=0.014])。 三、XRCC1單體型與非吸煙女性肺癌易感性關系 通過SHEsis軟件進行單體型分析

12、表明，本研究中的四種位點的單核苷酸多態(tài)存在著顯著的連鎖不平衡，D’最小為0.72(所有的P＜0.0001)。根據(jù)已知的4個位點基因型可推斷出12種單體型，我們將等位基因頻率小于0.03的單體型合并，有六種單體型在對照組中占93.9％，在病例組中占86％。對病例組和對照組單體型分布的總體檢驗發(fā)現(xiàn)存在顯著性差異(P＜0.0001)。與正常T-Arg-Arg-Arg單體型比較，T-Arg-His-Arg和T-Trp-Arg-Arg單體型可降低

13、患肺癌的風險，但不具有統(tǒng)計學意義(OR=0.67和0.75)；而T-Trg-Arg-Gin單體型可顯著提高患肺癌的風險(OR=2.26)。 四、烹飪油煙暴露與XRCC1多態(tài)基因型交互作用對非吸煙女性肺癌的影響 我們進一步利用非條件logistic回歸模型分析XRCC1 Arg399Gln或XRCC1T-77C與烹飪油煙暴露對非吸煙女性肺癌患病風險的交互作用。將雜合和純合突變基因型進行聯(lián)合分析，在有油煙暴露史的非吸煙女性中