血清瘦素及受體基因Gln223Arg多態(tài)性與胃食管反流病的相關性.pdf

1、背景:
　　 胃食管反流病(gastro-esophageal reflux disease，GERD)是上胃腸道動力障礙性疾病，近年來發(fā)病率呈上升趨勢，嚴重影響人們的生活質量。隨著對GERD認識的不斷深入，目前認為其病理生理機制主要是抗反流防御機制下降和反流物對食管黏膜攻擊作用增強。而一過性食管下括約肌松弛(transient lower esophageal sphincter relaxation，TLESR)、膈腳功能抑

2、制、食管裂孔疝、食管清除能力降低、胃排空延遲、近端胃擴張等是引起反流物對食管黏膜攻擊的主要因素。瘦素(Leptin)是一類由肥胖基因編碼的蛋白質類激素，可調節(jié)能量代謝和體脂平衡。在消化系統(tǒng)中，Leptin可通過中樞及外周神經系統(tǒng)，并可協(xié)同其他胃腸激素共同調節(jié)胃腸功能，如改變胃運動模式、延緩胃排空、參與炎癥反應、促進胃腸黏膜細胞的生長等。目前研究發(fā)現肥胖、高血壓、糖尿病、肝病等患者體內多存在高Leptin血癥，由于Leptin須與瘦素受體

3、(Leptin receptor，LEPR)結合后才可以發(fā)揮其病理生理功能，因而許多學者推測是否由于LEPR基因變異產生不同類型的LEPR，從而降低Leptin的生物學活性。進一步研究顯示，LEPR基因在上述患者體內存在多種基因變異，其多態(tài)性多來自于基因序列中的單堿基變異，如Lys109Arg，Gln223Arg、Ala976Asp等。但尚未見Leptin、LEPR基因Gln223Arg多態(tài)性與GERD關系的報道。本研究旨在探討Lept

4、in和LEPR基因Gln233Arg多態(tài)性與GERD的相關性，為進一步闡明GERD的發(fā)病機制提供理論依據。
　　 目的:
　　 測定GERD患者和健康體檢者外周血清Leptin水平及LEPR基因Gln223Arg多態(tài)性分布，探討血清Leptin及LEPR基因Gln223Arg多態(tài)性與GERD的相關性，尋找與GERD發(fā)病相關的血清Leptin水平及其相關基因型的變化，以進一步闡述GERD的發(fā)病機制，并為臨床防治提供理論依據

5、。
　　 資料與方法:
　　 1.1、研究對象
　　 2011年4月至2012年4月在山東大學第二醫(yī)院消化內科就診并接受GERD癥狀診斷問卷調查(Gerd Q)和胃鏡檢查，參考蒙特利爾GERD定義診斷為GERD的患者65例，根據胃鏡下表現分為反流性食管炎(refluxesophagitis，RE)27例、非糜爛性反流病(non-erosive reflux disease，NERD)35例和Barrett食管(b

6、arrett's esophagus，BE)3例。因BE患者數量較少，結果易產生偏差，暫不納入本次分析。選取同期健康體檢者63例為對照組。
　　 1.2、方法
　　 1.2.1、標本采集及常規(guī)檢測所有受檢者均隔夜空腹，測量身高、體重、腰圍、臀圍，計算體重指數(BMI)、腰臀比(WHR)，收集空腹血糖(fasting blood glucose，FBG)、甘油三酯(triglyceride，TG)等生化指標。采集肘靜脈血4

7、 ml×2，其中1組分離血清，-20℃保存，用于測定血清Leptin水平。另1組存放于EDTA-K+抗凝管中，-80℃保存，待提取基因組DNA。
　　 1.2.2、血清Leptin檢測采用酶聯免疫吸附試驗法(Enzyme-linked immune sorbent assay method，Elisa)檢測血清Leptin水平。
　　 1.2.3、血清LEPR基因Gln223Arg多態(tài)性檢測采用全血DNA提取試劑盒提取基

8、因組DNA，用聚合酶鏈反應-限制性片段長度多態(tài)性分析法(Polymerase chain reaction restriction fragment length polymorphism,PCR-RFLP)檢測LEPR基因Gln223Arg多態(tài)性。
　　 結果:
　　 1.RE組、NERD組與對照組在性別、年齡、BMI、WHR及TG、FBG間的比較均無統(tǒng)計學差異（P＞0.05），具有很好的匹配性。RE組、NERD組血清

9、Leptin水平（14.39±13.62，14.02±12.72）ng·mL-1均較對照組（6.79±9.26）ng·mL-1明顯升高，差異有統(tǒng)計學意義(P=0.026，P=0.041)。NERD組血清Leptin水平高于RE組，但差異無統(tǒng)計學意義(P=0.909)。
　　 2.將27例RE患者按LA分級，Leptin水平分別為:A級8例，（10.94±12.78）ng·ml-1;B級10例，(13.63±19.21) ng·m

10、l-1;C級5例，(14.04±20.15) ng·ml-1;D級4例，（16.35±15.83）ng·ml-1。Leptin水平與RE炎癥嚴重程度呈正相關(r=0.503)。
　　 3.將62例GERD患者按照LEPR基因型進行分組比較，GA+AA基因型者血清Leptin水平（15.14±11.31）ng·ml-1高于GG基因型（11.68±12.76）ng·ml-1，且差異具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。
　　 4.

11、RE組與NERD組的GA+AA基因型的頻率(37％、31.4％)均高于對照組(14.3％)，差異均有統(tǒng)計學意義(x2=5.87，x2=4.07，P值＜0.05);RE組、NERD組的A等位基因頻率(18.5％，15.7％)均高于對照組(7.1％)，差異均有統(tǒng)計學意義(x2=5.18, x2=8.01, P＜0.05)。
　　 結論:
　　 1.GERD患者中RE組、NERD組血清Leptin濃度均明顯高于對照組，提示GE

12、RD發(fā)生與血清Leptin的升高存在相關性。
　　 2.RE組患者中的Leptin水平隨著炎癥的嚴重程度逐漸升高呈正相關，提示血清Leptin水平可反映RE患者食管的炎癥程度。
　　 3.在中國山東地區(qū)GERD患者中存在LEPR基因Gln223Arg多態(tài)性，其中RE、NERD患者GA+AA基因型血清Leptin水平明顯高于GG基因型，提示GERD患者高Leptin血癥與LEPR基因Gln223Arg變異有關。