骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞對腦缺血大鼠軸突生長及AKT-GSK-3β-CRMP-2表達(dá)的影響.pdf

1、目的：骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（Bone mesenchymal stem cells，BMSCs）移植能夠促進(jìn)腦梗死后缺損的神經(jīng)功能恢復(fù)已被國內(nèi)外學(xué)者普遍接受。本研究旨在通過建立大鼠腦缺血再灌注模型，予以靜脈移植BMSCs后，檢測損傷側(cè)腦組織中神經(jīng)軸突再生情況以及腦組織中信號通道蛋白Akt/GSK-3β/CRMP-2表達(dá)的情況，以探討B(tài)MSCs促進(jìn)腦缺血大鼠神經(jīng)功能恢復(fù)的機(jī)制。
　　方法：
　　1、SD大鼠BMSCs細(xì)胞的分離培養(yǎng)

2、與誘導(dǎo)分化鑒定。
　　2、SPF級7-9周齡SD大鼠隨機(jī)分為四組：假手術(shù)組、MCAO模型組（MCAO組）、BMSCs治療組（MCAO+BMSCs組）、藥物干預(yù)組（MCAO+BMSCs+ LY294002組），每組12只。
　　3、采用改良線栓法建立大鼠大腦中動脈閉塞（Middle cerebral artery occlusion，MCAO）腦缺血模型。造模前1小時側(cè)腦室注射LY294002（Akt抑制劑）進(jìn)行干預(yù)，造模后2

3、4小時經(jīng)尾靜脈注射BMSCs（1×106）進(jìn)行治療。
　　4、采用修正的神經(jīng)行為學(xué)評分方法（mNSS）和改良貼紙去除試驗(yàn)評價各組大鼠MCAO模型后1、3、7、10、14天神經(jīng)功能，了解各組大鼠神經(jīng)功能變化情況。
　　5、MCAO模型14天后灌注取腦，通過western blot檢測缺血區(qū)周圍腦組織Akt/GSK-3β/ CRMP-2信號通路中pAkt/Akt、pGSK-3β/GSK-3β、pCRMP-2/CRMP-2及軸突膜

4、蛋白GAP-43蛋白的表達(dá)量。
　　結(jié)果：
　　1、體外培養(yǎng)的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞呈梭形，呈束狀、漩渦狀排列，可成功誘導(dǎo)為成骨細(xì)胞與脂肪細(xì)胞。
　　2、BMSC移植可以顯著改善MCAO大鼠神經(jīng)功能的恢復(fù)。
　　3、BMSCs移植可明顯增加MCAO大鼠pAKT/AKT、pGSK-3β/GSK-3β及 GAP-43的表達(dá)，同時減少pCRMP-2/CRMP-2的表達(dá)。
　　結(jié)論：
　　BMSCs可促進(jìn)腦缺血大鼠