月季砧木苗期根癌病抗性鑒定方法的研究.pdf

1、根癌病已嚴重影響到月季的觀賞價值和生產(chǎn)應(yīng)用。本論文研究了兩種月季砧木荷花薔薇(Rosa.multifloraf.carnea)(感病)和野薔薇No.4(Rosa.multiflora‘inermisNo.4')(抗病)無菌條件下成株和實生幼苗的獲得；活體、離體條件下，不同抗病鑒定方法對成株和幼苗的影響；以及成株和幼苗離體葉片經(jīng)根癌農(nóng)桿菌侵染后，苯丙氨酸解氨酶活性和乙酰丁香酮含量的變化。通過分析成株和幼苗檢測結(jié)果的相關(guān)性，擬建立適合月季砧

2、木苗期根癌病的鑒定方法。研究結(jié)果如下： (1)影響兩種砧木種子萌發(fā)最主要的因素是冷藏時間；野薔薇No.4種子在冷藏10～15d、GA30.05～0.1mg/L處理時發(fā)芽率在90％～100％，荷花薔薇種子在冷藏15d、GA30.15mg/L處理時達最高發(fā)芽率為73％。 (2)荷花薔薇莖段最適芽萌培養(yǎng)基是MS(無硝酸銨)+6-BA1.0，萌芽率是95％；最適增殖培養(yǎng)基是MS(無硝酸銨)+6-BA0.9+NAA0.01，增殖系

3、數(shù)為2.72；野薔薇No.4在MS(無硝酸銨)+6-BA0.9+NAA0.01培養(yǎng)基上的增殖系數(shù)為2.33。荷花薔薇和野薔薇No.4在1/2MS+0.5IBA培養(yǎng)基上的生根率分別為100％和87.5％。 (3)荷花薔薇和野薔薇No.4的扦插苗和實生苗根部浸泡接菌并水培后發(fā)現(xiàn)，根系均無腫瘤發(fā)生，但二者根系均比對照生長旺盛，表現(xiàn)在須根數(shù)量明顯增加。 (4)活體根頸處針刺接菌發(fā)現(xiàn)，荷花薔薇扦插苗根頸處發(fā)病率為80％，腫瘤的平均

4、直徑在23mm左右；野薔薇No.4扦插苗根頸處發(fā)病率為15％，腫瘤的平均直徑在15mm左右。兩者差異顯著。但無論是荷花薔薇還是野薔薇No.4，實生苗都沒有觀察到腫瘤的發(fā)生。 (5)離體葉片菌液侵染后檢測gus基因瞬時表達率。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，成株期葉片的gus基因瞬時表達率都高于苗期，從一定程度上反應(yīng)兩種薔薇材料苗期對根癌病的抗性強于成株期。而無論是成株期還是苗期，荷花薔薇的gus基因瞬時表達率峰值都高于野薔薇No.4，兩個時期存在極顯

5、著的相關(guān)性，可以用苗期的gus基因表達率來反應(yīng)成株期的表達率。 (6)離體葉片經(jīng)根癌農(nóng)桿菌侵染后，荷花薔薇和野薔薇No.4的幼苗和成株苯丙氨酸解氨酶活性變化呈現(xiàn)相同趨勢，均出現(xiàn)兩個高峰，分別在侵染后第1-2d和第4d，且野薔薇No.4比荷花薔薇峰值大。成株期和實生幼苗期的酶活存在正相關(guān)性，可以用苗期的酶活變化來反應(yīng)成株的抗性。 (7)成株期和實生幼苗期離體葉片經(jīng)菌液處理后，滲出物中乙酰丁香酮含量均為荷花薔薇高于野薔薇No