鎮(zhèn)肝熄風湯對原發(fā)性高血壓血管重構致腦組織病理改變的影響.pdf

1、目的：通過動物和細胞培養(yǎng)實驗，觀察鎮(zhèn)肝熄風湯對自發(fā)性高血壓大鼠(SHR)腦組織及其中動脈病理改變和鎮(zhèn)肝熄風湯含藥血清對體外培養(yǎng)血管緊張素Ⅱ(AngⅡ)刺激所致內皮細胞凋亡和平滑肌細胞增殖的影響，探討鎮(zhèn)肝熄風湯改善原發(fā)性高血壓腦組織病理和血管重構的機理，為該方應用于原發(fā)性高血壓及其繼發(fā)性損傷提供科學依據(jù)。 方法：將32只14周齡的雄性SHR隨機分為4組(SHR組、鎮(zhèn)肝熄風湯高劑量組、鎮(zhèn)肝熄風湯低劑量組、依那普利組)，同時以同源雄性

2、WKY大鼠8只作為對照組。灌胃給藥8周后，采用16導生理記錄系統(tǒng)記錄收縮壓；HE染色觀察腦組織及其中血管病理改變；放射免疫法檢測血漿和腦組織中AngⅡ、內皮素-1 (ET-1)含量；逆轉錄-多聚酶鏈反應(RT-PCR)法檢測腦組織中過氧化物酶體增殖物激活受體γ(PPARγ)mRNA表達。 采用酶消化法體外培養(yǎng)人臍靜脈內皮細胞(HUVECs)，鎮(zhèn)肝熄風湯含藥血清作用于10<'-6>mol/L AngⅡ刺激的HUVECs 24h。倒

3、置顯微鏡下觀察HUVECs形態(tài)、密度；流式細胞術Annexin V-FITC法測定HUVECs的凋亡；酶聯(lián)免疫法測定HUVECs上清腫瘤壞死因子α(TNF-α)含量；RT-PCR法測定人臍動脈平滑肌細胞(HUASMCs)PPARγmRNA的表達。采用組織貼塊法培養(yǎng)HUASMCs，鎮(zhèn)肝熄風湯含藥血清作用于10<'-6>mol/L AngⅡ刺激的HUASMCs 24h。用MTT法測定HUASMCs的增殖；RT-PCR法測定HUASMCs骨橋

4、蛋白(OPN)mRNA的表達。 結果：與WKY組相比，SHR組大鼠收縮壓升高(P<0.05)，腦組織神經細胞排列紊亂，彌散，失去明顯分層，神經細胞數(shù)目減少，結構模糊或消失，細胞核固縮，小膠質細胞增生，個別區(qū)域可見噬神經現(xiàn)象，腦中小動脈管腔/管壁面積降低。鎮(zhèn)肝熄風湯高、低劑量可降低SHR收縮壓，可明顯改善腦組織缺血，血管重構。與WKY組相比，SHR組大鼠血漿和腦組織中AngⅡ含量顯著升高(P<0.05)；腦組織中ET-1 含量顯著

5、升高(P<0.05)。鎮(zhèn)肝熄風湯高、低劑量均可降低SHR血漿AngⅡ含量，腦組織中ET-1 含量(P<0.05)。鎮(zhèn)肝熄風湯高劑量可降低SHR腦組織AngⅡ含量(P<0.05)。與WKY組相比，SHR組大鼠腦組織中PPARγmRNA表達減弱(P<0.05)。鎮(zhèn)肝熄風湯高、低劑量均可使SHR腦組織中PPARγmRNA表達增強(P<0.05)。 10<'-6>mol/L AngⅡ可導致HUVECs密度降低，凋亡率增加，TNF-α的分

6、泌增加，PPARγmRNA的表達降低(P<0.05)。鎮(zhèn)肝熄風湯含藥血清可降低HUVECs凋亡率，減少TNF-α的分泌，增強PPARγmRNA表達(P<0.05)。10<'-6>mol/L AngⅡ可促進HUASMCs A<,490>升/高，OPN mRNA表達增強(P<0.05)。鎮(zhèn)肝熄風湯含藥血清可降低HUASMCs A<,490>，抑制OPN mRNA的表達(P<0.05)。 結論：鎮(zhèn)肝熄風湯具有降壓效應，可改善高血壓腦組