三種齒科合金誘導L9292細胞凋亡進行Bcl-2家族基因檢測.pdf

1、目的：
　　 生物醫(yī)用材料中的不銹鋼是臨床應用中最多,最廣泛的一類材料。新型醫(yī)用高氮無鎳奧氏體不銹鋼(BIOSSN4高氮無鎳奧氏體不銹鋼)是中科院金屬研究所新近研制的一種醫(yī)用不銹鋼材料。這種材料優(yōu)良的機械性能已經得到了實驗證實,通過檢測Caspase-3的表達強度來評價新型醫(yī)用高氮無鎳奧氏體不銹鋼的生物相容性,初步證實了該種材料符合臨床應用材料的生物相容性要求。本實驗通過檢測Bcl-2家族基因的表達強度來分析新型醫(yī)用高氮無鎳奧氏

2、體不銹鋼,進一步研究這種合金的生物相容性,以期使之更好的應用于臨床。
　　 材料與方法：
　　 1.細胞培養(yǎng)
　　 用含10%胎牛血清的RPMI1640細胞培養(yǎng)基在37℃,5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)L929細胞并傳代。
　　 2.DAPI染色進行細胞形態(tài)學檢測
　　 設立實驗組(新型醫(yī)用高氮無鎳奧氏體不銹鋼組),對照組(317L不銹鋼組,金合金組,空白對照組)。用4種液體分別培養(yǎng)L929細胞48h后,

3、進行DAPI染色,熒光顯微鏡下觀察細胞凋亡情況并計算細胞凋亡率。
　　 3.Bcl-2及Bax對合金浸提液的檢測
　　 實驗組和對照組用3種合金浸提液及空白對照組分別培養(yǎng)L929細胞48h后,進行Bcl-2及Bax檢測,流式細胞儀檢測熒光強度。
　　 結果：
　　 1.各組細胞于合金浸提液中培養(yǎng)48h后,經DAPI染色后,經熒光顯微鏡觀察均可見凋亡細胞。
　　 2.各組細胞在浸提液的作用下48h之

4、后,Bcl-2的熒光表達強度為:空白對照組＞金合金組＞新型醫(yī)用高氮無鎳奧氏體不銹鋼組＞317L不銹鋼組;Bax的熒光表達強度為:317L不銹鋼組＞新型醫(yī)用高氮無鎳奧氏體不銹鋼組＞金合金組＞空白對照組.各組之間熒光表達強度有顯著性差異(P＜0.05)
　　 結論：
　　 1.三種材料的生物相容性由好及差依次為:金合金組＞新型醫(yī)用高氮無鎳奧氏體不銹鋼＞317L不銹鋼。
　　 2.在48h時間段,各組合金B(yǎng)cl-2的熒