脊髓背角線粒體形態(tài)和功能異常參與小鼠炎性痛和神經(jīng)病理性痛的研究.pdf

1、1、炎性痛和神經(jīng)病理性痛模型小鼠脊髓背角中線粒體的分布和亞細(xì)胞形態(tài)變化
　　線粒體在炎性痛和神經(jīng)病理性痛的病理生理學(xué)中發(fā)揮重要作用，但機(jī)制未明。本研究通過鞘內(nèi)注射線粒體示蹤劑Mitotracker Red CMXRox探針（Mito-Red），結(jié)合共聚焦顯微鏡觀察，分別于福爾馬林誘致急性痛、完全弗氏佐劑（Complete Freund’s Adjuvant，CFA）誘致持續(xù)性痛以及部分神經(jīng)損傷（Spared nerve injur

2、y，SNI）誘致神經(jīng)病理性痛模型不同時(shí)間點(diǎn)，檢測脊髓背角線粒體分布和亞細(xì)胞形態(tài)改變。結(jié)果顯示：持續(xù)性炎性痛和神經(jīng)病理性痛等慢性痛狀態(tài)下，脊髓背角淺層（I-II層）和深層（III-V層）內(nèi)神經(jīng)元線粒體由散在、顆粒狀轉(zhuǎn)變?yōu)榫酆?、簇狀（圖6），該過程可能反映了脊髓背角水平線粒體的功能障礙，這種異?？赡苁羌顾柚袠忻艋臋C(jī)制之一。由此提示在預(yù)防和治療慢性痛時(shí)應(yīng)考慮對(duì)線粒體的異常進(jìn)行合理干預(yù)。
　　2、脊髓水平線粒體在福爾馬林痛模型急性相和強(qiáng)

3、直相中的功能不同
　　既往研究表明，脊髓活性氧簇（Reactive oxygen species，ROS）參與福爾馬林痛模型強(qiáng)直相中樞敏化過程；線粒體是ROS主要來源，但在疼痛中的作用尚不清楚。本研究首先提取福爾馬林痛模型小鼠脊髓組織勻漿和提純線粒體，檢測丙二醛（malondialdehyde，MDA）、ROS和過氧化氫（hydroperoxide，HP）水平以反映脊髓氧化應(yīng)激水平變化；然后檢測線粒體ATP酶活性、線粒體膜電位（M

4、itochondrial membrane potential，Δψm）及線粒體解偶聯(lián)蛋白（Uncoupling protein）UCP2和UCP4的表達(dá)，以反映脊髓線粒體功能變化和線粒體保護(hù)機(jī)制的啟動(dòng)；最后觀察鞘內(nèi)注射抗氧化劑TEMPOL（4-hydroxy-2,2,6,6-tetramethylpiperidine-1-oxyl）和/或UCP4RNAi對(duì)福爾馬林痛模型小鼠雙相痛行為的影響。結(jié)果顯示：脊髓過氧化水平在福爾馬林痛模型小鼠

5、雙相均增高；脊髓線粒體功能在福爾馬林痛模型小鼠急性相明顯減低，而在強(qiáng)直相增強(qiáng)；脊髓線粒體保護(hù)機(jī)制參與福爾馬林痛模型小鼠強(qiáng)直相過程。以上結(jié)果提示，脊髓水平線粒體在福爾馬林痛模型雙相痛中功能不同，在急性相線粒體主要發(fā)生功能損傷，在強(qiáng)直相線粒體功能趨于恢復(fù)，線粒體保護(hù)機(jī)制啟動(dòng)，以對(duì)抗線粒體穩(wěn)態(tài)失衡。由此提示在疼痛的產(chǎn)生和維持中，不同狀態(tài)的線粒體可能扮演不同角色；只有清晰了解線粒體的功能變化特點(diǎn)才能對(duì)疼痛特別是針對(duì)慢性痛的不同時(shí)期進(jìn)行合理干預(yù)。