ERAP1、ANTXR2、IL1R2、IL23R、JAK2和STAT3多態(tài)性與強直性脊柱炎的關聯(lián)性研究.pdf

1、強直性脊柱炎（ankylosing spondylitis，AS）是一種致殘率很高的常見病，全球范圍內(nèi)的發(fā)生率為0.1％-0.9％，我國的發(fā)生率約為0.3％。AS的易感性極大程度上決定于遺傳因素，遺傳度超過90％。最為人們熟知的與AS易感性關聯(lián)的基因是主要組織相容性復合體（major histocompatibility complex，MHC）中的人類白細胞抗原（human leukocyte antigen，HLA）-B27，95％

2、的AS患者HLA.B27陽性。然而，HLA-B27陽性的普通人群中只有1％-5％發(fā)病，且HLA-B27對于AS遺傳易感性的貢獻僅占總體遺傳傾向的16％-40％，而雙胞胎和AS家系研究的數(shù)據(jù)表明非MHC基因的作用占了60-70％；AS的同胞危險比率（λs）大約為82，其中λHLA值僅為5-6，而λ非MHC卻在14左右。這表明非MHC基因?qū)τ贏S的易感性具有十分重要的作用。近期，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)氨基肽酶（endoplasmic reticulum a

3、minopeptidase，ERAP）-1、炭疽毒素受體（anthrax toxin receptor，ANTXR）-2、白細胞介素1-2型受體（interleukinl type 2 receptor，IL1R2）和IL23受體（IL23R）基因單核苷酸多態(tài)性（single nucleotide polymorphism，SNP）被發(fā)現(xiàn)與高加索人群AS的易感性高度相關。進一步在多種族中驗證這種相關性對于下一步針對這四個基因開展深入研究

4、非常必要，我國尚無這方面的報道。
　　 AS的臨床和病理表現(xiàn)與患者體內(nèi)免疫功能的失衡密切相關。近年來，IL23/Th17/IL17軸在AS中的作用受到越來越多的關注，其中強致炎因子IL17是炎癥效應的關鍵，也是最終環(huán)節(jié)。IL17由輔助性T細胞亞群（helper T cells，Th）亞群Th17細胞產(chǎn)生。JAK（Janus kinase）2和STAT（signal transducer and activator of tran

5、scription）3在幼稚的T細胞向Th17細胞的分化中發(fā)揮關鍵作用。此外，JAK2還是“IL23通路”基因網(wǎng)絡的成員。有研究證實JAK2和STAT3與炎癥性腸?。╥nflammatory bowel disease，IBD）的易感性相關，而IBD與AS不僅在臨床上緊密相關，易感基因也可能存在重疊。因此JAK2和STAT3基因多態(tài)性與AS也可能存在關聯(lián)。
　　 本研究擬在中國漢族人群中驗證ERAP1、ANTXR2、IL1R2和

6、IL23R多態(tài)性與AS發(fā)病的相關性，同時鑒定JAK2和STAT3多態(tài)性與AS易感性之間是否關聯(lián)。具體分為以下兩個部分：
　　 笫-部分：ERAP1、ANTXR2、ILlR2、IL23R多態(tài)性在中國漢族人群中與AS發(fā)病的關聯(lián)研究
　　 目的：研究中國漢族人群中ERAP1、ANTXR2、IL1R2、IL23R多態(tài)性與AS發(fā)病之間的關聯(lián)性。
　　 材料及方法：按照1984年修訂的紐約標準，從門診及住院患者中共收集中國漢

7、族AS患者200例及對照200例。每位研究對象用抗凝管采集靜脈血2ml，AxyPrep血基因組DNA小量試劑盒提取DNA，利用基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時間質(zhì)譜（MALDI-TOF）基因分型技術對病例及對照血樣ERAP1、ANTXR2、IL1R2、IL23R基因共14個SNP進行檢測。14個SNP均為選自與高加索人群AS患者易感性相關的位點。等位基因頻率、基因型頻率在病例組和對照組之間的相對危險度和95％置信區(qū)間等數(shù)據(jù)采用Plink軟件系

8、統(tǒng)進行。單倍型分析使用Haploview 4.1完成。
　　 結(jié)果：14個SNP以及基因型在病例組和對照組中的分布均無顯著性差異（P>0.05）。其中rs11209026在所有研究對象中均不具備多態(tài)性。
　　 結(jié)論：ERAP1、ANTXR2、IL1R2、IL23R多態(tài)性在中國漢族人群中與AS的易感性無關。本研究的結(jié)果與高加索人群AS的相關性研究結(jié)果截然相反，進一步證明了同種疾病在不同人種之間的遺傳背景和易感基因均存在差異

9、，提示復雜多基因疾病的遺傳學研究在設計時上應嚴格考慮人群分層。
　　 第二部分：JAK2和STAT3多態(tài)性與AS易感性的相關性研究
　　 目的：研究JAK2和STAT3與AS易感性是否相關。
　　 材料及方法：根據(jù)修訂紐約標準，收集中國漢族AS患者200例及對照200例。MALDI-TOF技術對JAK2和STAT3基因的10個SNP進行檢測。其中7個為利用SNP Brower 3.5軟件基于pairwise r2

10、法篩選出JAK2和STAT3基因中r2<0.85、最小等位基因頻率（minor allelic frequency，MAF）大于0.3的標簽SNP，另外3個為文獻中與IBD相關的SNP。Haploview4.1進行單倍型分析。Plink軟件完成多態(tài)性、單倍型及其與AS相對危險度和95％置信區(qū)間等數(shù)據(jù)的統(tǒng)計分析。
　　 結(jié)果：10個SNP位點及基因型在病例組和對照組之間的分布無統(tǒng)計學差異（P>0.05）。單倍體分析顯示，位于JAK