大鼠腎小球系膜細(xì)胞系的建立及ISP-I對(duì)其細(xì)胞周期蛋白的調(diào)控作用研究.pdf

1、華中 科 J 之 大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院 博士學(xué) 位論文。 前言大鼠腎小球系膜細(xì)胞系的建立及I S P - I 對(duì)其細(xì)胞周期蛋白的調(diào)控作用研究目 吐 舀腎 小 球 系 膜 細(xì)胞( G l o m e n d a r M e s a n g i a l C e l l , G M C ) 在腎 臟 的 組 織 結(jié) 構(gòu) 及 其生理功能等方面起著十分重要的作用。 G M C 和細(xì)胞基質(zhì)共同構(gòu)成了腎小 球系膜，它是維持腎 小球毛細(xì)血管拌的 結(jié)構(gòu)基

2、礎(chǔ)。 G M C具有支持和保護(hù)作用， 能產(chǎn)生細(xì)胞外基質(zhì)， 參與調(diào)節(jié)腎小球的 濾過、 免 疫反 應(yīng)、 炎 癥反 應(yīng)等多種生理功能。 體外培養(yǎng) G M C是研究腎功能 和腎 小球疾病的 產(chǎn)生、 發(fā)展必不可少的 手段之一。由于G M C在 體 外 培養(yǎng)難 度大， 耗費(fèi) 財(cái)力 和時(shí)間， 建 立 一株 永生系 有 利于 研 究工作的順利開 展。 S V 4 0 ( 非洲綠猴腎細(xì)胞病毒) 能轉(zhuǎn)染嚙 齒類動(dòng)物或哺乳動(dòng)物二倍體細(xì)胞使 之 永生 化。 迄

3、 今為 止， 研究 者 應(yīng)用S V 4 0 已 成功 建立了 多 株永 生 化細(xì)胞系 O l我們 應(yīng)用S V 4 0 病毒穩(wěn)定轉(zhuǎn)染大鼠G M C ， 并成 功建立了 一株具有密 度依賴性、 錨著依賴性、 血清依 賴性、 無(wú)非整倍體異常 D N A核型、 無(wú)裸鼠 致瘤性、具有正常表型的大鼠腎 小球系膜細(xì)胞永生系。G M C 增生、 肥大并最終纖維化是腎 臟疾病慢性進(jìn)展的 共同 細(xì)胞學(xué)特征。 肥大G M C 可 產(chǎn)生 大 量1 , I I

4、 I . I V型 膠原 及l(fā) a m i n i n 、 纖 維結(jié) 合蛋白 等細(xì) 胞外基 質(zhì)并導(dǎo)致腎 小 球 硬 化 [ 2 1 。 伴 隨 著G M C增生 、 肥 大 過 程中 的 細(xì) 胞一 基 質(zhì) 結(jié) 構(gòu)的 重 塑 是 腎臟 疾 病進(jìn) 展的 關(guān)鍵。 細(xì) 胞的 增生、 肥大由 細(xì)胞 周 期調(diào) 節(jié)蛋白 最終決定 [ 3 1 。 細(xì)胞 周期 中 起 調(diào) 控 作 用 的 是 細(xì) 胞 周 期 蛋白 ( C y c l i n ) 、 細(xì)

5、 胞 周 期 蛋白 依 賴 性 激酶 ( C y c l i nd e p e n d e n t k i n a s e , C D K ) 和 細(xì) 胞 周 期 蛋 白 依 賴 性 激 酶 抑 制 因 子 1 4 1 ( C D K i n h i b i t o r s ,C D K D . C y c l i n 與C D K結(jié) 合形 成的C y c l i n - C D K 復(fù) 合 物在不同 細(xì)胞周 期的 有 序表達(dá)

6、及 其 磷 酸 化與 去 磷酸 化狀態(tài)， 調(diào) 控 細(xì)胞 周 期 時(shí) 相的 轉(zhuǎn)換。 C y c l i n s 的 表 達(dá)水平 是華中 科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院 博士學(xué) 位論文 · 前言參考文獻(xiàn)1 . S h a n k l a n d S J , W o l f G C e l l c y c l e r e g u l a t o r y p r o t e i n s i n r e n a l d i s

7、e a s e : r o l e i nh y p e r t r o p h y , p r o l i f e r a t i o n a n d a p o p t o s i s . A n J P h y s i o l , 2 0 0 0 ; 2 7 8 : F 5 1 52 . P a r d e e A B . G , e v e n t s a n d r e g u l a t i

8、o n o f c e l l p r o l i f e r a t i o n . S c i e n c e , 1 9 8 9 ; 2 4 6 : 6 0 33 . K o b a y a s h i O , S a k a g u c h i M , O k i t s u T , e t a l . I m p r o v e m e n t i n t h e d i f e r e n

9、 t i a t e d h e p a t i cp h e n o t y p e o f i m m o r t a l i z e d h u m a n h e p a t o c y t e s b y a d e n o v i r u s m e d i a t e d p 2 1 g e n e t r a n s f e r .A S A I O J , 2 0 0 2 ; 4 8 ( 4

10、 ) : 3 5 54 . G u l b i s J M. K e l m a n z H , H u r w i t z J , e t a l . S t u c t u r e o f t h e C - t e r m i n a l r e g i o n o f p 2 1( W A F 1 / C I P 1 ) c o m p l e x w i t h h u m a n P C

11、N A . C e l l , 1 9 9 6 ; 8 7 : 2 9 75 . F u j i t a T , I n o u e K , Y a m a m o t o S , e t a l . F u n g a l m e t a b o l i t e s . P a r t 1 1 . A P o t e n t I m -m u n o s u p p r e s s i v e a

12、 c t i v i t y f o u n d i n I a r a S i n c l a i r M e t a b o l i t e . J A n t i b i o , 1 9 9 8 ; 4 7 :2 0 86 . L i n C Y , K u F M, K u o Y C , e t a l . I n h i b i t i o n o f a c t i v a t e d

13、 h u m a n m e s a n g i a l c e l lp r o l i f e r a t i o n b y t h e n a t u r a l p r o d u c t o f C o r d y c e p s S i n e n s i s ( H I - A ) : A n i m p l i c a t i o nf o r t r e a t r m e n t o

14、 f I g A m e s a n g i a l n e p h r o p a t h y . J L a b C l i n M e d , 1 9 9 9 ; 1 3 3 ( 1 ) : 5 57 . B i n n i g G , R o h r e r H . S c a n n i n g T u n n e l i n g M i c r o s c o p y . P h y s

15、A c t a , 1 9 8 2 ; 5 5 : 7 2 68 . B i n n i g G , Q u a t e C F , G e r b e r C . A t o m i c f o r c e m i c r o s c o p e . P h y s R e v L e t , 1 9 8 6 ; 5 6 :9 3 09 . H a n s m a P K , E l i n g s

16、 V B , M a r t i O , e t a l . S c a n n i n g t u n n e l i n g m i c r o s c o p y a n d a t o m i cf o r c e m i c r o c o p y : a p p l i c a t i o n . S c i e n c e , 1 9 8 8 ; 2 4 2 : 2 0 91 0 . B

17、r a e t F , S e y n a e v e C , Z a n g e r D R , e t a l . I m a g i n g s u r f a c e a n d s u b m e m b r a n e o u ss t r u c t u r e s w i t h t h e a t o m i c f o r c e m i c r o s c o p e : a s