特定人群HSP70基因多態(tài)性及抗原抗體水平的研究.pdf

1、盡管人們研究了多種疾病與HSP70基因多態(tài)性間的關(guān)系,但是HSP70基因多態(tài)在缺氧所引起的高原反應(yīng)中的意義和作用尚未見相關(guān)報道.該研究首次進(jìn)行了這方面的研究與探討.為探討HSP70基因多態(tài)性與高原反應(yīng)間的關(guān)系,該研究選武警戰(zhàn)士為研究對象,應(yīng)用聚合酶鏈反應(yīng)—限制性片斷長度多態(tài)性(polymerase chain reaction—restriction fragment length polymorphism,PCR-RFLP)分析方法研

2、究了戰(zhàn)士中HSP70-1、HSP70-2及HSP70-hom的基因多態(tài)性.其中72名為高原反應(yīng)組,173名為對照組.HSP70是一個多基因家族,編碼的是一組高度相關(guān)的蛋白質(zhì),每一種蛋白質(zhì)成分在疾病或應(yīng)激中的作用也不盡相同.如何將這些高度相關(guān)的蛋白質(zhì)分離開來并分別進(jìn)行研究是當(dāng)前所面臨的重要課題,這就要求將新的技術(shù)應(yīng)用于HSP70的分析中來,其中的關(guān)鍵技術(shù)就是雙向聚丙烯酰胺凝膠電泳(two-dimensional polyacrylamid

3、e gel electrophoresis,2-D PAGE).而目前關(guān)于HSP70蛋白多態(tài)性的研究多針對動物,其結(jié)果難以簡單外推到人.因此該研究使用雙向電泳技術(shù)來分離人體細(xì)胞中的蛋白質(zhì)組成分,并用特異性的抗體鑒定其中的HSP70.經(jīng)過反復(fù)摸索后發(fā)現(xiàn),樣本制備是其中最重要的環(huán)節(jié).該試驗使用了兩種蛋白酶抑制劑,從而有效地保障了蛋白成分不被消化.對試驗中的一些關(guān)鍵環(huán)節(jié)進(jìn)行了優(yōu)化,發(fā)現(xiàn)適當(dāng)延長等電聚焦電泳時間可以得到較好的結(jié)果.此外,運(yùn)用2D