大白菜種子純度測(cè)定技術(shù)研究.pdf

1、大白菜作為我國(guó)主要的蔬菜作物在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中占有重要位置。本文對(duì)大白菜種子純度檢驗(yàn)方法，大白菜形態(tài)特征特性數(shù)據(jù)采集標(biāo)準(zhǔn)、性狀描述標(biāo)準(zhǔn)、形態(tài)數(shù)據(jù)庫(kù)的建立進(jìn)行了研究；針對(duì)大白菜種子特點(diǎn)對(duì)Au-PAGE進(jìn)行改進(jìn)，建立大白菜種子蛋白質(zhì)電泳方法；根據(jù)電泳純度檢測(cè)結(jié)果與田間純度試驗(yàn)結(jié)果的相關(guān)性，分析該電泳方法檢測(cè)純度的可行性。主要研究結(jié)果如下： 1．制定了大白菜特征特性數(shù)據(jù)的采集標(biāo)準(zhǔn)和性狀描述標(biāo)準(zhǔn)對(duì)大白菜特征特性相關(guān)數(shù)據(jù)進(jìn)行了搜集整理，制定了大

2、白菜不同生育期形態(tài)特征特性的數(shù)據(jù)采集標(biāo)準(zhǔn)和性狀描述標(biāo)準(zhǔn)，將促進(jìn)品種登記的標(biāo)準(zhǔn)化，利于品種保護(hù)和純度檢驗(yàn)工作的開(kāi)展。 2．建立了形態(tài)特征特型數(shù)據(jù)庫(kù)和組合表建立了山東省12個(gè)主要大白菜品種的形態(tài)特征特性數(shù)據(jù)庫(kù)，為區(qū)分和鑒定品種及品種管理、質(zhì)量控制工作提供了科學(xué)規(guī)范的依據(jù)。明確了苗期的子葉形狀、顏色和真葉形狀、顏色、茸毛有無(wú)、結(jié)球期的葉球的發(fā)育進(jìn)化程度、球心閉合程度、葉球形狀、葉片抱合方式、球頂形態(tài)、球心顏色類型等性狀具有豐富的多態(tài)性

3、，在品種鑒定和品種保護(hù)中具有重要作用。 分別對(duì)苗期、成株期、結(jié)球期性狀穩(wěn)定性和多態(tài)性進(jìn)行分析，建立了品種形態(tài)組合表。鑒定依據(jù)的主要性狀為：苗期的子葉形狀、顏色，基生葉的形狀、顏色及茸毛的多少；成株期的外葉形狀、顏色、茸毛的多少、葉柄顏色；結(jié)球期的葉球發(fā)育進(jìn)化程度、球心閉露程度、葉球形狀、球內(nèi)葉片抱合方式及球頂形態(tài)。 3．優(yōu)化了大白菜種子純度電泳技術(shù)體系樣品制備：數(shù)取種子，單粒砸碎放入離心管，加去離子水40 μ l室溫提取

4、40分鐘，10000轉(zhuǎn)離心3分鐘后取上清15 μ l與調(diào)整液(10％TEMED、30％HAC、15％脲、少量甲基綠)1：1混勻備用。 制膠：裝電泳槽，取15毫升凝膠(10％丙烯酰胺、10％脲、2％HAC、0.4％NaAC、0.25％雙丙烯酰胺、0.02％FeS04)加30 μl催化劑(3％過(guò)硫酸銨)封底。取凝膠30毫升加30 μl催化劑灌膠。 電泳：每孔加蛋白質(zhì)樣品25 μ l，加電極液(2％HAC)，穩(wěn)壓40mA/板進(jìn)

5、行電泳。指示劑到達(dá)膠底停止電泳，染色后觀察記載。 該電泳方法能將87-114、改良青雜3號(hào)、晉菜三號(hào)、魯白6號(hào)、早熟五號(hào)6個(gè)品種的雜交種與雙親自交粒和雜粒區(qū)分開(kāi)，表明優(yōu)化后的電泳體系具較強(qiáng)的檢雜能力。 4．建立了電泳與田間純度檢驗(yàn)結(jié)果相關(guān)性方程對(duì)大白菜9個(gè)不同品種的種子樣品電泳純度與田間純度檢驗(yàn)結(jié)果的相關(guān)系數(shù)為0.826(R<,0.01(7)>=0.798)，達(dá)到極顯著水平，證明了該方法可用于純度檢驗(yàn)。建立了電泳純度檢驗(yàn)