甲戊肝炎病毒重組抗原的表達、純化和免疫原性鑒定.pdf

1、甲肝病毒(Hepatitis A virus，HAV)和戊肝病毒是腸道傳播的肝炎病毒。兩種都是無包膜的正鏈小RNA病毒。HAV主要感染兒童，但隨著年齡增加，一旦感染，肝炎癥狀會更嚴重。戊肝暴發(fā)主要發(fā)生在許多發(fā)展中國家，導致數(shù)萬人感染。在孕婦患者中，戊肝致死率較高，可達20％。此外，HAV和HEV從流行病學到臨床癥狀都很相似，主要依靠實驗室檢查進行鑒別。已有文獻報道因飲用了被HAV和HEV污染的水而同時感染甲肝和戊肝的病例。 本論

2、文主要研究了HAV vp1和HEV ORF2編碼的抗原片斷形成嵌合類病毒顆粒的免疫原性。將HAV vp1(aa 24～171)與HEV ORF2(aa 431～615)N端相連，形成重組抗原AEAg342或與ORF2C端相連，形成EAAg342重組抗原。將上訴兩種嵌合抗原基因插入表達載體pBV220，在大腸桿菌BL21中獲得了高效表達。但只有重組蛋白EAAg342能形成直徑10～20 mm的VLP顆粒。SDS-PAGE顯示該抗原能形成部

3、分二聚體結(jié)果，Western blot顯示該二聚體能與人抗HAV和HEV陽性血清反應。 本研究評價了重組蛋白AEAg342和EAAg342誘導的特異體液免疫反應。兩組昆明鼠，每組5只，分別注射一種重組抗原10μg+弗氏佐劑，3周后再注射一次，同時設(shè)一組空白對照組。于第一次免疫后2，4，6，8和10周采血測特異性抗HAV和HEV IGg滴度。結(jié)果顯示EAAg342誘導的抗體滴度在第8周達到了1:80 000，顯著高于AEAg342